SNX3抑制剂在制备防治肝纤维化药物中的应用

本发明属于生物医药。更具体地，涉及snx3抑制剂在制备防治肝纤维化药物中的应用。

背景技术：

1、肝纤维化是指肝脏受到反复损伤后产生的一种过度性修复反应，表现为肝细胞外基质蛋白过度沉积与异常分布。肝纤维化进一步会发展为肝硬化，肝硬化最终会发展为肝癌。全世界每年约有200万人死于肝病，其中50％死于肝硬化并发症，50％死于病毒性肝炎和肝细胞癌，因此，早期发现肝纤维化，并对其进行干预治疗，对于预防肝硬化、肝癌极为重要。

2、肝星状细胞(hepatic?stellate?cells,hscs)受到激活后转化为具有增殖性、收缩性、高表达α-sma(α-平滑肌肌动蛋白)的肌成纤维细胞，产生大量的细胞外基质蛋白，从而促进肝纤维化的发生发展。尽管已开展大量靶向细胞、分子的药物临床试验，但由于肝纤维化的发生机制复杂，影响因素众多，目前仍缺乏用于临床治疗的药物。因此，寻找新的治疗靶点具有重要的临床意义。

3、snx3(sorting?nexin?3)是snxs(sorting?nexins)家族中结构最简单的亚型，仅包含px基本结构域(phox?homology?domain)，可与液泡分选家族形成逆转运复合物，介导货物蛋白的转运与分选过程。已经有报道提到snx3过表达会导致心脏肥大和心力衰竭，研究表明snx3在心脏功能中起关键作用，并暗示snx3作为心脏肥大和心力衰竭的潜在治疗靶点(jing?lu,suowen?xu,yuqing?huo?et?al.sorting?nexin?3induces?myocardialinjury?via?promoting?retromer-dependent?nuclear?trafficking?of?stat3.celldeath&differentiation,2021.)，但是其在肝纤维化中的作用仍不确定。

技术实现思路

1、本发明要解决的技术问题是克服现有技术肝纤维化临床治疗药物有限的缺陷和不足，提供snx3抑制剂在制备防治肝纤维化药物中的应用，弥补snx3在肝纤维化领域应用的空白，同时为肝纤维化的治疗提供新的靶点和策略。

2、本发明的另一目的是提供一种用于治疗肝纤维化的药物。

3、本发明上述目的通过以下技术方案实现：

4、snx3抑制剂在制备防治肝纤维化药物中的应用。

5、进一步地，所述snx3抑制剂减少snx3蛋白或基因表达。

6、优选地，所述snx3抑制剂为si-snx3，其序列如seq?id?no：1所示。

7、本发明所述snx3抑制剂能减少snx3蛋白或基因表达，可通过本领域技术人员所熟知的基因沉默、基因敲除、基因编辑或基因敲减等常规现有技术实现。如利用rna干扰(rnai)技术可以特异性剔除或关闭特定基因的表达；利用基因编辑技术的工具可以是crispr/cas9技术、锌指核酸酶(zfns)或转录激活因子样效应物核酸酶(talens)技术等，但不限于此。

8、利用基因敲减(基因敲低，gene?knock-down)技术从转录后水平或翻译水平使snx3基因表达失活或基因沉默的技术为本领域技术人员所熟知。所述基因敲减技术包括rna干扰、morpholino干扰、反义核酸、核酶或显性负抑制突变，但不限于此。

9、利用病毒(如慢病毒、腺相关病毒)表达的shrna或sirna抑制snx3基因的表达，进行snx3基因的沉默也是本领域技术人员所熟知的常规现有技术。

10、同时，本发明还提供其它可选，所述snx3抑制剂为以snx3或其转录本为靶序列，且能够抑制snx3蛋白表达或基因转录的sirna、dsrna、shrna、mirna、反义核酸；或能表达或形成所述sirna、dsrna、shrna、mirna、反义核酸的载体构建物。

11、进一步地，所述载体构建物为细菌质粒、噬菌体、重组病毒载体或真核重组表达载体中的至少一种。

12、进一步地，所述snx3抑制剂下调细胞外基质蛋白表达。

13、优选地，所述细胞外基质蛋白为纤连蛋白、胶原蛋白-ⅰ。

14、进一步地，所述药物还包括药学上可接受的辅料。

15、进一步地，所述药物为口服药物或注射药物。

16、优选地，所述口服药物的剂型为片剂、胶囊剂、颗粒剂或口服液体剂。

17、优选地，所述注射药物的剂型为水针剂、油针剂或粉针剂。

18、一种用于治疗肝纤维化的药物，所述药物包括序列如seq?id?no：1所示的si-snx3。

19、进一步地，所述药物还包括药学上可接受的辅料。

20、本发明具有以下有益效果：

21、本申请?；nx3抑制剂在制备用于防治肝纤维化的疾病药物中的应用，主要涉及了一种肝脏中snx3蛋白或基因，其结构中含有px基本结构域。经实验室研究表明，在正常小鼠经胆管结扎诱导肝纤维化后，小鼠肝脏中snx3蛋白和基因表达随着肝脏纤维化程度增加；由此，本发明以snx3基因敲除小鼠为实验对象，研究snx3基因在肝纤维化中的作用，结果显示snx3基因缺失可减轻胆管结扎诱导的的肝纤维化，提示snx3可作为肝纤维化的治疗靶标，snx3的抑制剂是有效的肝纤维化治疗药物；同时，本发明发现抑制snx3基因或蛋白表达的si-snx3在人肝星状细胞lx2中，可明显降低细胞中纤连蛋白(fibronectin)、胶原蛋白-ⅰ(col-ⅰ)表达量。本发明实验结果表明，snx3有望靶向肝纤维化的多重发病机制，为肝纤维化的治疗提供了一种新的手段，且有潜力成为防治多种肝脏疾病的作用靶点。

技术特征：

1.snx3抑制剂在制备防治肝纤维化药物中的应用。

2.根据权利要求1所述应用，其特征在于，所述snx3抑制剂减少snx3蛋白或基因表达。

3.根据权利要求2所述应用，其特征在于，所述snx3抑制剂为si-snx3，其序列如seq?idno：1所示。

4.根据权利要求1～3任一所述应用，其特征在于，所述snx3抑制剂下调细胞外基质蛋白表达。

5.根据权利要求1～3任一所述应用，其特征在于，所述药物还包括药学上可接受的辅料。

6.根据权利要求1～3任一所述应用，其特征在于，所述药物为口服药物或注射药物。

7.根据权利要求6所述应用，其特征在于，所述口服药物的剂型为片剂、胶囊剂、颗粒剂或口服液体剂。

8.根据权利要求6所述应用，其特征在于，所述注射药物的剂型为水针剂、油针剂或粉针剂。

9.一种用于治疗肝纤维化的药物，其特征在于，所述药物包括序列如seq?id?no：1所示的si-snx3。

10.根据权利要求9所述药物，其特征在于，所述药物还包括药学上可接受的辅料。

技术总结
本发明属于生物医药技术领域，具体涉及SNX3抑制剂在制备防治肝纤维化药物中的应用。本发明以SNX3基因敲除小鼠为实验对象，研究SNX3基因在肝纤维化中的功能，结果显示SNX3基因缺失可减轻胆管结扎诱导的肝纤维化，提示SNX3可作为肝纤维化的治疗靶标；另外本发明中抑制SNX3蛋白及基因表达的si?SNX3，经细胞实验验证能有效抑制肝纤维化；可见SNX3抑制剂是有效的肝纤维化治疗药物。本发明为肝纤维化的治疗提供了一种新的手段，SNX3有望靶向肝纤维化的多重发病机制，有潜力成为防治多种肝脏疾病的应用靶点。

技术研发人员：路静,刘培庆,张静,喻文静,马定虎,彭明霞
受?；さ募际跏褂谜撸?/b>中山大学
技术研发日：
技术公布日：2024/4/24