一种含1,2,3?三氮唑的4?苯胺基喹唑啉衍生物及制备方法
【专利摘要】本发明涉及一种含1,2,3?三氮唑的4?苯胺基喹唑啉衍生物及制备方法，将4?(3?氨基)苯基?6,7?二甲氧基喹唑啉和1,2,3?三氮唑加入到反应器中，加入反应溶剂和催化剂，搅拌均匀后，在80～140℃反应；反应完毕后，产物冷却至室温后，减压蒸馏除去溶剂，所得固体用乙醇重结晶，真空干燥得类白色固体。本发明提供的一种含1,2,3?三氮唑的4?苯胺基喹唑啉衍生物将喹唑啉、席夫碱以及三氮唑基团有机结合，具有一定的抗肿瘤作用，还有助于降低肿瘤细胞对药物产生的抗药性的可能。该合成路线具有原料易得、操作简单、节省溶剂、减少污染等优点，易于工业化生产。
【专利说明】
-种含1，2，3-Ξ氮性的4-苯胺基喧性嘟衍生物及制备方法
技术领域
[0001] 本发明属于药物及中间体合成技术领域，具体设及一种含1，2,3-Ξ氮挫的4-苯胺 基哇挫嘟衍生物及制备方法。
【背景技术】
[0002] 哇挫嘟类化合物是一类具有良好生物活性的含氮杂环化合物，其在抗菌、抗炎、抗 高血压和抗癌等方面都显示出优良的活性。自1994年Fry等发现4-苯胺基哇挫嘟 (PD153035)可用作EGFR酪氨酸激酶的特异性抑制剂W来，哇挫嘟类化合物成为酪氨酸激酶 抑制剂类抗肿瘤药研发的热点之一。有文献报道称4-苯胺基哇挫嘟类化合物是目前为止发 现的活性最高、选择性最好的一类酪氨酸激酶抑制剂。其中，4-取代苯胺哇挫嘟类化合物是 哇挫嘟类酪氨酸激酶抑制剂中活性较高的一类化合物，4-苯胺基3位亲脂性吸电子基团的 取代能够增加抑制活性，其对多种肿瘤如乳腺癌、肺癌、胃癌、前列腺癌都表现出很好的抗 肿瘤作用。目前已有四个与之有关的小分子药物上市。第一代EGFR抑制剂吉非替尼 (Gefitinib)和埃罗替尼化rlotinib)己经被美国食品药品监督管理局批准治疗非小细胞 肺癌症病人。拉帕替尼化apatinA)作为一种双向可逆的EGFR和肥R-2抑制剂己经被批准用 于乳腺癌的治疗。凡德他尼(Vandetanib)是由我国自主研发，于2011年获准用于治疗晚期 NS化C。而4个上市的小分子药物中都含有相同的4-苯胺基哇挫嘟母核结构。
[0003] Ξ氮挫化合物是一类非常重要的化合物，具有芳香环的稳定性W及很好的生物兼 容性，将不同底物的药效团通过Ξ氮挫环链接成为一个分子，其产物可通过氨键和偶极作 用来提高与生物祀点的结合能力，已有众多的Ξ氮挫衍生物作为抗菌、抗肿瘤、抗炎症、抗 高血压等药物广泛应用于临床。席夫碱官能团，也是极有价值的药效基团?；谝┬排剂?策略，为开发高效低毒的抗肿瘤药物，将Ξ氮挫和席夫碱生物活性组合片段分别引入4-苯 胺基哇挫嘟结构单元中，合成了新型含Ξ氮挫的4-苯胺基哇挫嘟席夫碱类化合物，在医药 方面有着广泛的应用前景。
【发明内容】
[0004] 本发明目的在于提供一种含1，2,3-Ξ氮挫的4-苯胺基哇挫嘟衍生物及制备方法。
[0005] 本发明提供的一种含1，2,3-Ξ氮挫的4-苯胺基哇挫嘟衍生物，其结构通式如下：
[0006]
[0007]式中，R为氨，甲基，乙基，苯基，邮晚基的任一种；
[000引本发明还提出一种含1，2,3-Ξ氮挫的4-苯胺基哇挫嘟衍生物的制备方法，W4- (3-氨基)苯基-6,7-二甲氧基哇挫嘟为原料，与1，2,3-Ξ氮挫发生亲核加成反应制得。其合 成路线为：
[0009]
[0010] 具体步骤如下；
[0011] 向干燥的反应器中加入4-(3-氨基）苯基-6,7-二甲氧基哇挫嘟和1，2,3-Ξ氮挫， 加入反应溶剂和催化剂，揽拌均匀后，在80-140°C反应。反应完毕后，产物冷却至室溫后，减 压蒸馈除去溶剂，所得固体用乙醇重结晶，真空干燥得类白色固体。其中：4-(3-氨基)苯基- 6，7-二甲氧基哇挫嘟与1，2，3-Ξ氮挫的摩尔比为1:1~1.5; 4-( 3-氨基)苯基-6，7-二甲氧 基哇挫嘟与催化剂的摩尔比为1:0.1~0.2;反应溶剂为乙醇，氯仿，甲苯，N，N-二甲基甲酯 胺或二甲亚讽中的任一种或者W上溶剂的任意混合溶剂，优选甲苯;催化剂为甲酸，乙酸， 苯横酸，Ξ氯化飽，四氯化铁中的任一种，优选四氯化铁；
[0012] 本发明还提供了所述含1，2,3-Ξ氮挫的4-苯胺基哇挫嘟衍生物在制备抗肿瘤药 物中的应用。
[0013 ]本发明提供的一种含1，2，3-Ξ氮挫的4-苯胺基哇挫嘟衍生物将哇挫嘟、席夫碱W 及Ξ氮挫基团有机结合，可作为蛋白激酶抑制剂，并可用于与金属销、钉等金属的配位，形 成金属配合物，在生物医学、医药等领域都有着十分重要应用前景具有一定的抗肿瘤作用， 还有助于降低肿瘤细胞对药物产生的抗药性的可能。该合成路线具有原料易得、操作简单、 节省溶剂、减少污染等优点，易于工业化生产。
【具体实施方式】
[0014]下面结合具体实施例对本发明作进一步说明。
[001引实施例1:4-( 3-氨基巧基-6,7-二甲氧基哇挫嘟的制备
[0016] (1)2-硝基-5,6-二甲氧基苯甲酸甲醋(2)的制备
[0017]
[001引将30mL的冰醋酸加入到反应器中，加入3,4-二甲氧基苯甲酸乙醋（9.8邑，5011111101)， 在冰水浴冷却下滴加20mL65 %的浓硝酸，滴加完毕后，室溫反应12小时。反应完成后，用饱 和碳酸钢溶液中和，水相乙酸乙醋萃取，无水硫酸钢干燥。过滤除去干燥剂，旋转蒸发除去 溶剂，得红色油状液体2-硝基-5，6-二甲氧基苯甲酸甲醋10.9g，收率90.8 %。
[0019] (2)2-氨基-5,6-二甲氧基苯甲酸甲醋（3)的制备
[0020]
[0021] 将2-硝基-3，4-二甲氧基苯甲酸乙醋（12.5g，50mmol)加入到氨化反应蓋中，加入 50血甲醇溶解，加入Ig 10%的Pd/C，向反应蓋通入氨气，保持内压为5MPa，40°C反应1小时。 反应完成后，过滤出去Pd/C，滤液旋转蒸发除去溶剂，得黄色液体2-氨基-5,6-二甲氧基苯 甲酸甲醋10.2g，收率96.7%。
[0022] (3) 6，7-二甲氧基-4 (3H)-哇挫嘟酬(4)的制备
[0023]
[0024] 向反应器中加入2-氨基-3，4-二甲氧基苯甲酸乙醋（5.3g，25mmol)，加入30mL甲酯 胺溶解，加入甲酸锭，升溫至170°C反应12小时。反应完成后，先冷却至室溫，然后用冰水浴 冷却至固体析出，过滤，所得固体用甲醇重结晶得6,7-二甲氧基-4(3H)-哇挫嘟酬4.43g，收 率 86.0%。
[0025] (4) 4-氯-6，7-二甲氧基-4( 3H)-哇挫嘟(5)的制备
[0026]
[0027] 向反应器中加入6，7-二甲氧基-4(3H)-哇挫嘟酬(5g，24.3mmol)，加入30mL氯化亚 讽，加入0.5mL N，N-二甲基甲酯胺，升溫至回流反应2小时。反应完成后，旋转蒸发出去氯化 亚讽，冰水浴下向残余物中加入饱和碳酸氨钢溶液，揽拌至无气体放出。加入二氯甲烧萃 取，无水硫酸钢干燥。过滤除去干燥剂，旋转蒸发除去溶剂得淡黄色固体4-氯-6,7-二甲氧 基-4(3H)-哇挫嘟4.52g，收率83.1 %。
[0028] (5)4-( 3-氨基)苯基-6,7-二甲氧基哇挫嘟(6)的制备
[0029]
[0030] 向反应器中加入4-氯-6，7-二甲氧基-4(3H)-哇挫嘟（2.25g，lOmmol)，加入50血异 丙醇溶解，加入间苯二胺（1.19g，llmmol)，揽拌均匀后，升溫至回流，反应2小时。反应完成 后，冷却至室溫。过滤，所得固体用乙醇重结晶得4-(3-氨基）苯基-6,7-二甲氧基哇挫嘟 2.64g，收率89.2%。lHNMR(400MHz，CD30D):δ8.30(s，lH)，7.67(s，lH)，7.02-7.11(m，3H)， 6.91(d，J = 8.0Hz，lH)，6.54(d，J = 8.0，lH)，3.97(s，3H)，3.94(s，3H);MS(ESI)m/z 297([M +H] + );Anal.Calcd for Cl讯化化04:C，64.85;H,5.44;N,18.91;found:C，64.76;H,5.53;N, 18.71.
[0031 ] 实施例2:苯基-1，2，3-Ξ氮挫-4-苯胺基哇挫嘟席夫碱的制备
[0032]
[0033] 向反应器中加入4-(3-氨基）苯基-6，7-二甲氧基哇挫嘟（1.48g，5mmol)，加入苯 基-1，2,3-Ξ氮挫-4-醒（0.87,5mmol)，加入30mL甲苯作溶剂，加入四氯化铁（0.095g， 0.5mmol)，揽拌均匀后，升溫至回流，反应4小时。反应完成后，旋转蒸发除去甲苯，残余物用 乙醇重结晶或者硅胶柱层析得苯基-1,2，3-Ξ氮挫-4-苯胺基哇挫嘟席夫碱1.95g，收率 86.7%〇1h 醒R(DMS0-d6,300MHz):8.71(s，lH)，8.42(s，lH)，8.30(s，lH)，7.04-7.80(m, llH)，3.97(s，3H)，3.94(s，3H);MS(ESI):m/z 452(M+H);Anal.Calcd.for C2出2iN7〇2:C, 66.51;H，4.69;N，21.72;R)und:C，66.54;H，4.69;N，21.71.
[0034] 实施例3:化晚基-1，2，3-Ξ氮挫-4-苯胺基哇挫嘟席夫碱的制备
[0035]
[0036] 向反应器中加入4-(3-氨基)苯基-6,7-二甲氧基哇挫嘟（1.48邑，51111]1〇1)，加入化晚 基-1，2,3-Ξ氮挫-4-醒（1.31，7.5111111〇1)，加入3〇1111^乙醇作溶剂，加入四氯化铁（0.19邑， Immol)揽拌均匀后，升溫至回流，反应4小时。反应完成后，冷却析晶，过滤得化晚基-1，2,3- =氮挫-4-苯胺基哇挫嘟席夫碱1.84g，收率81.5%。
[0037] 1h NMR(DMS0-d6,300MHz):8.78(s，lH)，8.50(s，lH)，8.39(s，lH)，7.90-8.05(m, 2H)，7.09-7.75(m，8H)，3.97(s，3H)，3.94(s，3H);MS(ESI):m/z 453(M+H);Anal.Calcd.for C24出oN8〇2:C，63.71;H，4.46;N，24.76;R)und:C，63.64;H，4.49;N，24.71.
[0038] 实施例4:1，2,3-Ξ氮挫-4-苯胺基哇挫嘟席夫碱的制备
[0039]
[0040] 向反应器中加入4-(3-氨基)苯基-6，7-二甲氧基哇挫嘟（1.48g，5mmol)，加入1，2， 3-Ξ氮挫-4-醒（0.73g，7.5mmol)，加入20mL N，N-二甲基甲酯胺作溶剂，加入Ξ氯化飽 (0.16g，lmmol)揽拌均匀后，升溫至回流，反应4小时。反应完成后，旋转蒸发除去甲苯，残余 物用乙醇重结晶或者硅胶柱层析得1，2,3-Ξ氮挫-4-苯胺基哇挫嘟席夫碱1.70g，收率 90.7%〇1h 醒R(DMS0-d6,300MHz):8.75(s，lH)，8.35(s，lH)，7.94(s，lH)，7.29-7.58(m, 5H),7.09(s,lH),4.01(s,3H),3.99(s,3H)；MS(ESI):m/z 376(M+H)；Anal.Calcd. for Cl 姐 17 化 〇2:C，60.79;H，4.56;N，26.12;R)und:C，60.74;H，4.59;N，26.11.
[0041 ] 实施例5:甲基-1，2，3-Ξ氮挫-4-苯胺基哇挫嘟席夫碱的制备
[0042]
[0043] 向反应器中加入4-(3-氨基）苯基-6，7-二甲氧基哇挫嘟（1.48g，5mmol)，加入甲 基-1，2，3-Ξ氮挫-4-醒（0.67g，6mmol)，加入lOmL二甲亚讽作溶剂，加入醋酸（0.06g， Immo 1)揽拌均匀后，升溫至回流，反应4小时。反应完成后，向反应液中加入30mL水，过滤，所 得固体用乙醇重结晶或者硅胶柱层析得甲基-1,2，3-Ξ氮挫-4-苯胺基哇挫嘟席夫碱 1.72g，收率88.2%。lHNMR(DMS0-d6,300MHz):8.70(s，lH)，8.49(s，lH)，7.85(s，lH)，7.25- 7.62(m，5H)，7.02(s，lH)，3.98(s，3H)，3.96(s，3H)，3.80(s，3H);MS化SI):m/z390(M+H); Anal.Calcd.foK^)Hi9^〇2:C，61.69;H，4.92;N，25.18;R)und:C，61.71;H，4.89;N，25.13.
[0044] 实施例6:乙基-1，2，3-Ξ氮挫-4-苯胺基哇挫嘟席夫碱的制备
[0045]
[0046] 向反应器中加入4-(3-氨基）苯基-6,7-二甲氧基哇挫嘟（1.48g，5mmol)，加入乙 基-1,2,3-^氮挫-4-醒(0.63旨，51111]1〇1)，加入301]11^^氯甲烧作溶剂，加入苯横酸(0.079邑， 0.5mmol)揽拌均匀后，升溫至回流，反应4小时。反应完成后，旋转蒸发除去Ξ氯甲烧，残余 物用乙醇重结晶或者硅胶柱层析得乙基-1，2，3-Ξ氮挫-4-苯胺基哇挫嘟席夫碱1.85g，收 率91.6%。lHNMR(DMS0-d6,300MHz):8.72(s，lH)，8.43(s，lH)，7.79(s，lH)，7.21-7.64(m， 甜），7.05(s，lH)，3.97(q，2H)，3.95(s，3H)，3.92(s，3H)，1.58(t，3H);MS(ESI):m/z404(M+ H)；Anal.Calcd.for C21H21N7O2:C,62.52；Η,5.25；N,24.30；Found:C,62.51；Η,5.28；N, 24.33.
[0047] 实施例7:抗肿瘤活性实验
[004引对于化合物的生物学活性，W人乳腺癌细胞(MCF-7)为研究对象，用MTT法测定肿 瘤细胞的增殖情况。
[0049] 具体实施如下：取对数生长期的肿瘤细胞计数，培养基稀释后接种于96孔培养板 内，每孔10化L细胞液，浓度约为3~5 X 104个/mL。过夜培养(5%C〇2，37°C)，待细胞贴壁后进 行给药，分别设给药组，阳性对照组和阴性对照组。待测的配合物用DMS0或5%的葡萄糖溶 液配制成胆液，临用前用细胞培养基稀释成7个浓度梯度，其中DMS0的终浓度不超过4%。。每 个浓度设5个复孔。加药后培养24~48小时，加10化浓度为5mg/血的MTT，37°C解育4小时，去 上清，每孔加入15化L的DMS0溶解，震摇。用酶标仪在570nm波长下测定每孔0D值，并计算抑 制率，做浓度-抑制率曲线计算IC50值。
[0050] 实施例2-6制得的含1，2，3-Ξ氮挫的4-苯胺基哇挫嘟衍生物对人乳腺癌细胞 (MCF-7)测试实验的半数抑制浓度IC5〇，W及对照组阳性药Cisplatin、吉非替尼对人乳腺癌 细胞(MCF-7)测试结果如表1所示。通过实验我们发现合成的含1，2,3-Ξ氮挫的4-苯胺基哇 挫嘟衍生物具有抑制MCF-7(人乳腺癌细胞)肿瘤细胞的功能，虽然与抑制该肿瘤细胞的目 前通用的阳性药Cispaltin比较，具有一定的差距，但与吉非替尼进行比较，发现该类化合 物对于肿瘤细胞的抑制作用与吉非替尼接近，可W看出我们设计的含1，2,3-Ξ氮挫的4-苯 胺基哇挫嘟衍生物在抗肿瘤方面存在抑制功能，具有一定的应用前景。
[0051 ] 表-1人乳腺癌细胞(MCF-7)测试结果
[0化2]
[0053] W上所述，仅是本发明的较佳实施例，并非对本发明作任何形式上的限制，任何熟 悉本专业的技术人员，在不脱离本发明技术方案范围内，依据本发明的技术实质，对W上实 施例所作的任何简单的修改、等同替换与改进等，均仍属于本发明技术方案的?；し段е?内。
【主权项】
1. 一种含1，2，3-Ξ氮挫的4-苯胺基哇挫嘟衍生物，其特征在于其结构通式如下：式中，R为氨、甲基、乙基、苯基或化晚基的任一种； 其具体结构式分别如下：2. 权利要求1所述的含1，2,3-Ξ氮挫的4-苯胺基哇挫嘟衍生物的制备方法，其特征在 于： 具体步骤如下： 将4-(3-氨基）苯基-6，7-二甲氧基哇挫嘟和1，2，3-Ξ氮挫加入到反应器中，加入反应 溶剂和催化剂，揽拌均匀后，在80~140°C反应;反应完毕后，产物冷却至室溫后，减压蒸馈 除去溶剂，所得固体用乙醇重结晶，真空干燥得类白色固体;其中，所述4-(3-氨基)苯基-6， 7-二甲氧基哇挫嘟与1，2，3-Ξ氮挫的摩尔比为1:1~1.5;所述4-( 3-氨基）苯基-6，7-二甲 氧基哇挫嘟与催化剂的摩尔比为1 :〇. 1~0.2。3. 如权利要求2所述的含1，2，3-Ξ氮挫的4-苯胺基哇挫嘟衍生物的制备方法，其特征 在于:所合成的化合物结构中含有哇挫嘟、席夫碱W及Ξ氮挫基团。4. 如权利要求2所述的含1，2，3-Ξ氮挫的4-苯胺基哇挫嘟衍生物的制备方法，其特征 在于:所述步骤中的1，2，3-Ξ氮挫为1H-1，2，3-Ξ氮挫-4-醒、1-甲基-1，2，3-Ξ氮挫-4-醒、 1-乙基-1，2，3-Ξ氮挫-4-醒、1-苯基-1，2，3-Ξ氮挫-4-醒或1-(2-化晚基)-1，2，3-Ξ氮挫- 4-醒中的任一种。5. 如权利要求2所述的含1，2，3-Ξ氮挫的4-苯胺基哇挫嘟衍生物的制备方法，其特征 在于:所述步骤中反应溶剂为乙醇、Ξ氯甲烧、甲苯、N，N-二甲基甲酯胺或二甲亚讽中的任 一种或者W上溶剂的任意混合溶剂。6. 如权利要求2所述的含1，2，3-Ξ氮挫的4-苯胺基哇挫嘟衍生物的制备方法，其特征 在于:所述步骤中催化剂为甲酸、乙酸、苯横酸、Ξ氯化飽或四氯化铁中的任一种。7. 权利要求1所述的含1，2，3-Ξ氮挫的4-苯胺基哇挫嘟衍生物在制备抗肿瘤药物中的 应用。
【文档编号】C07D401/14GK106083740SQ201610390703
【公开日】2016年11月9日
【申请日】2016年6月3日 公开号201610390703.9, CN 106083740 A, CN 106083740A, CN 201610390703, CN-A-106083740, CN106083740 A, CN106083740A, CN201610390703, CN201610390703.9
【发明人】刘霞, 苏长会
【申请人】江苏开放大学