乌洛地辛盐的制作方法

背景技术：

1、乌洛地辛或称为7-[(3r,4r)-3-羟基-4-羟基甲基-吡咯烷-1-基甲基]-3,5-二氢-吡咯并[3,2-d]嘧啶-4-酮的药物化合物，结构已知为：

2、

3、抑制许多参与人类疾病的相关酶，包括嘌呤核苷磷酸化酶(pnp)。

4、乌洛地辛已经被开发了用于治疗许多人类疾病，包括但不限于痛风、皮肤病、癌症、b细胞和t细胞介导的疾病、细菌感染和原生动物感染。例如，在美国专利no.7553839中还描述了乌洛地辛的用途。

5、此外，化合物乌洛地辛的药用盐在文献中是众所周知的。

6、这些包括但不限于盐酸盐、二盐酸盐、氢溴酸盐、半硫酸盐、对甲苯磺酸盐、磷酸盐、柠檬酸盐、l-酒石酸盐、l-乳酸盐、硬脂酸盐、马来酸盐、琥珀酸盐、富马酸盐和l-苹果酸盐。此外，化合物与c4有机二酸的半盐和单盐可包括琥珀酸、富马酸、l-苹果酸、马来酸、l-酒石酸、l-天冬氨酸的盐，并且已在本领域中举例说明。

7、虽然已经描述了许多乌洛地辛的盐，但是许多盐形式显示出的性质对于生产方法和/或在药物中的应用不是最佳的。例如，盐酸盐或其它盐已显示含有多晶型变体?？赡芷谕竦貌痪哂谢蚓哂屑跎倭康木逍问轿榷ǖ亩嗑捅涮宓囊┪锘衔锏难?。

8、混合盐还可以提供与单独的非混合盐不同的物理性质的潜在性，因此可以有助于制备药物产品，其用途的适用性取决于活性药物成分的性质。与未混合的盐一样，混合盐通常是多晶型的，并且其中一些是不稳定的。

9、此外，关于加工，仍然存在与制备有用的乌洛地辛盐相关的相当大的技术障碍。值得注意的是，即使如参考org.process?research和dev.2009,13,928复制游离形式的乌洛地辛，本身并非没有挑战。此后，生产稳定的盐并提供用于这样做的可靠且一致的方法存在第二个障碍。已经描述了形成多种乌洛地辛盐的方法，但是迄今为止，这些方法尚未鉴定或生产用于期望的药物用途的候选盐。

10、因此，期望开发稳定的盐(无论是混合的还是非混合的)以及它们的制备方法，其将用于制备改进的乌洛地辛药物。

11、发明简述

12、在第一方面，本公开的发明包括至少一种乌洛地辛盐，所述盐选自戊二酸盐、丙二酸盐和/或草酸盐。这样的盐形式以前尚未从现有技术中发现、表征或制备，但是本发明人已经长期致力于产生用于临床使用的合适的另外的候选物，并表征相关选择以确定它们用于潜在的医学应用的适用性。这样的工作已经超出了在盐的常规选择期间进行的单纯典型的工作，因为首先这些盐的生产是具有挑战性的。在多个实施方案中，盐包括半盐。所述半盐化学计量产生稳定的形式，其在一些情况下可在加热和干燥时转化为无水形式。然而，找到产生稳定的半形式的方法是一个技术挑战，并且这被本发明人所克服。

13、在多个实施方案中，所述盐包含半戊二酸盐，并且在优选的实施方案中，所述盐包含乌洛地辛的半l-戊二酸盐结晶盐。

14、尽管最初生产具有技术上的挑战性，但是最终发现，与本领域已知的乌洛地辛的其他稳定盐形式相比，半l-戊二酸盐晶体形式没有显示出多晶型变体。不显示多晶型物的物理稳定的盐是药物制备中非常期望的性质。此外，当与其他试验的盐相比时，半l-戊二酸盐具有非常好的物理稳定性。此外，该选择的盐与可药用琥珀酸盐相比是有利的，并且显示出比琥珀酸盐更有利，在一些条件下在两周期间令人惊奇地显示出更少降解。

15、之前的公开不能用于确定制备如所述的且属于本文所要求的本发明的范围的某些新的乌洛地辛盐，也不可能对其表征。本领域通常使用乌洛地辛游离碱作为起始原料来制备相应的盐。之前的研究很少进行阐明这种特定形式是否符合盐选择可接受的标准。似乎不存在涉及重结晶的挑战的文字指导，找到制备稳定晶型的方法是有创造性的，因为本领域没有教导或指导如何制备它，并且常规方法不能产生可用的晶型。现有技术中不存在指导：从特定溶剂中重结晶产生已知稳定且有用的该形式或其它特定新形式。

16、与其他可用的盐相比，本发明人制备的戊二酸盐不是明确的，也不是显而易见的选择候选物。通常，盐的选择需要考虑安全性，并且可以包括评估几种分析参数以确定其他有用的化学和物理性质，例如图形中的清晰和尖锐的衍射峰，考虑任何明显的无定形峰，溶剂重量损失和在各种条件下获得晶型的能力。在初步评估中，戊二酸盐满足安全性考虑，例如，谷氨酸似乎是安全性可接受的，但是在标准准则下在其他方面不是立即选择的盐。例如，初始分析表明结晶度低(没有尖锐的衍射峰)和一些明显的溶剂重量损失。然而，进行了广泛的进一步实验和检验以阐明和确定半戊二酸盐形式是否可以形成稳定的晶体，因为这在本领域以前的工作中是未知的。

17、此后，本技术人遇到了需要克服以获得稳定的晶体形式的技术挑战。例如，首先需要制备半戊二酸盐，并且需要用不同的溶剂以不同的顺序和采用不同的条件进一步重结晶以提供稳定的晶体，而不是标准化结晶。本发明人成功地确定了稳定的晶体形式，并且在多个实施方案中，公开了当盐是戊二酸盐时，其可以是(a)50％至100％结晶，更特别地至少50％结晶、或至少60％结晶、或至少70％结晶、或至少80％结晶、或至少90％结晶、或至少95％结晶、或至少98％结晶、或至少99％结晶、或至少99.5％结晶、或至少99.9％结晶，例如100％结晶。

18、此外，按照本文的研究，有用的稳定盐混合物是合理和可行的，其中已知另外的盐是稳定的，但是其可以受益于具有其中包括的新的半l-戊二酸盐。

19、这样的组合避免了与本领域的盐混合物相关的问题，例如与不稳定性和多晶型行为相关的问题。在一个实施方案中，本发明因此可以包括包含至少戊二酸盐(如本文定义和描述的)与另外的第二可药用的、物理和化学上第二稳定的盐的组合的组合物。在多个实施方案中，该第二盐可以包括半琥珀酸盐。

20、在多个实施方案中，乌洛地辛的盐可以选自不同特征的盐，例如无定形半盐，例如草酸盐和半丙二酸盐。本发明人还能够首次制备和表征这些替代盐，并且这样做为药物制造提供了进一步的替代选择。

21、在多个实施方案中，这些盐中的两种或更多种的组合可以选自例如戊二酸盐、半戊二酸盐或半l-戊二酸盐，以及丙二酸盐或草酸盐。

22、本发明人能够确定本发明的盐在水中的良好制剂稳定性，并且因此确定用于配制药物的有用的放大(scale-up)可能性。该工作被认为有助于支持关于iv制剂的进一步工作，例如用于动物研究和临床试验。因此，本发明还涉及药物化合物，其包含如上所述的本发明的盐形式的乌洛地辛或盐组合物混合物。

23、本发明还扩展至药物化合物，其包含治疗有效量的本文所述的盐形式或如本文所述的本发明的盐混合物的组合物，用作药物。在这种情况下，所述药物化合物可以用作pnp的抑制剂。

24、在一个进一步的方面，本公开提供了制备乌洛地辛的半戊二酸盐或半l-戊二酸盐的方法。已经阐明，重结晶步骤对于获得半盐或半l-盐非常关键的，特别地：乙醇与其他步骤的结合对于形成半戊二酸盐晶体是必需的，否则仅获得其他盐，例如单盐(1:1)，这是不期望的。

25、本公开提供了制备乌洛地辛半戊二酸盐或乌洛地辛半l-戊二酸盐的方法，其包括以下步骤：

26、(a)制备乌洛地辛游离碱的水溶液，并任选地在室温下搅拌；

27、(b)向步骤(a)的混合物中加入戊二酸或l-戊二酸，并任选地在室温下搅拌30分钟；

28、(c)冷冻干燥步骤(b)的溶液，得到白色固体产物；

29、(d)将(c)的固体产物溶于水中；任选地加热至75℃；加入乙醇，并任选地在75℃下搅拌30分钟，形成均匀溶液；

30、(e)向(d)的溶液中滴加乙腈，任选地经60分钟的期间；

31、(f)将(e)的溶液搅拌60分钟，任选地在75℃下；并且，任选地经60分钟的期间将所述溶液冷却至0℃；

32、(h)过滤并用乙腈洗涤，得到乌洛地辛半盐戊二酸盐。

33、此外，在上述方法中，当加入戊二酸时，可以加入一定量的期望的最终盐形式，以有助于结晶过程。

34、在一些实施方案中，本公开因此提供了制备乌洛地辛的戊二酸盐，特别是半戊二酸盐或半l-戊二酸盐的方法。

35、上述方法可以包括在所公开的一个或多个步骤之后的保持时间。

36、在多个实施方案中，上述制备乌洛地辛半戊二酸盐的方法可以进一步包括步骤(a)在制备乌洛地辛游离碱的水溶液中需要使用游离形式的反应物：

37、

38、理想地，根据本发明的方法及其实施方案能够可靠且一致地生产乌洛地辛的半戊二酸盐，这在现有技术中是不可能的。

39、通过大量的实验及其进一步的技术改进，已经有可能鉴定、获得并提高这种新描述的盐在期望应用中用于后续药物(onward?pharmaceutical)和临床方法的必要产率。因此，已经遇到了与可确认和可再现的新盐候选物的失败相关的相当大的技术挑战，以及证实了其在制剂和批量生产中的实际用途，以用于在医学和疾病治疗中的后续应用。

40、在多个实施方案中，本公开的盐化合物还可以根据下文说明书中另外阐述的具体实施例制备。

41、术语和缩写：

42、如本文使用的，以下术语和标准方法具有以下阐述的含义。

43、术语“api”是指活性药物成分。

44、术语“单”指在化合物乌洛地辛的盐的晶体结构中，api：酸的比例分别为1：1。

45、术语“半”指在化合物乌洛地辛的盐的晶体结构中，api：酸的比例分别为2：1。

46、术语“惰性有机溶剂”指不会化学干扰反应的溶剂。

47、术语“同构结构的(isostructural)”用于描述具有相同类型的晶体结构(例如当新的分子实体在晶体结构中取代另一种分子实体而不显著干扰晶胞时)的结晶物质。

48、术语“可药用的”，例如可药用的载体、赋形剂等，意指药理学上可接受的并且对施用特定化合物的受试者基本上无毒。

49、术语“可药用盐”指保留可能对于药物用途可接受的已知标准化合物的生物有效性和性质并且无毒的盐。

50、缩写：

51、acn：乙腈

52、dsc：差示扫描量热计

53、dmso：二甲亚砜

54、dvs：动态蒸气吸附

55、etoh：乙醇

56、fassif：禁食状态模拟肠液

57、fessif：进食状态模拟肠液

58、hplc：高效液相色谱

59、meoh：甲醇

60、nmr：核磁共振

61、plm：偏振光显微镜

62、rt：室温

63、rrt：相对保留时间

64、sgf：模拟胃液

65、tfa：三氟乙酸

66、tga：热重分析器

67、thf：四氢呋喃

68、trs：总相关物质

69、xrpd：x射线粉末衍射

70、简要说明

71、以下附图有助于提供由各种分析测试产生的图形分析，其显示本公开中的盐的物理和化学性质。

72、图1显示了根据本公开提供和制备的乌洛地辛的半l-戊二酸盐的xrpd标记的图谱；

73、图2显示了根据本公开提供和制备的乌洛地辛的相同半l-戊二酸盐的dsc和tga覆盖图；

74、图3显示了根据本公开的在dvs之前和之后的乌洛地辛的半l-戊二酸盐的xrpd覆盖图；

75、图4显示了证实根据本公开提供和制备的乌洛地辛的半l-戊二酸盐样品的高溶解度的hplc覆盖图；

76、图5显示了根据本文的公开内容提供的半l-戊二酸盐的xrpd覆盖图，证实了优异的固态稳定性；图6显示了根据本公开提供和制备的乌洛地辛的半l-戊二酸盐放大样品的标记的图谱；和图7显示了根据本公开提供和制备的乌洛地辛的半l-戊二酸盐放大样品的dsc和tga覆盖图。

技术实现思路

0、概述表

1、

2、乌洛地辛半丙二酸盐

3、两批乌洛地辛半丙二酸盐xprd图谱表明该化合物是无定形的，没有明显的衍射峰，因此没有进行进一步的表征。

4、乌洛地辛半草酸盐

5、xprd图谱表明，一批是结晶性差的，接近无定形，仅具有一个小的明显衍射峰，另一批是无定形的，因此没有进行进一步的表征。

6、晶体盐的表征

7、在清楚指示半琥珀酸盐、半己二酸盐和半l-戊二酸盐的晶体形式之后，进行进一步的表征研究，然后测定溶解度。

8、以下概述表显示了为表征三种晶体盐而进行的进一步分析研究的全部结果：

9、

10、

11、通过目测观察和双折射和非双折射，乌洛地辛半-l-戊二酸盐为白色固体，在plm下，具有颗粒和不规则的块状形态。xprd图案表明该化合物是如图1所示的晶体，但是可能具有的结晶性差，这与plm结果一致。显示不同衍射峰的信息提供如下：

12、

13、如图2所示，dsc迹线在190.03℃下显示一个单一熔点。在tga曲线下从rt至190℃发现2.637％重量损失，这可能是由于水的去溶剂化物引起的，因为通过karl-fischer滴定测定的水含量为2.53％。乌洛地辛半-l-戊二酸盐是中等吸湿性的，在dvs图上，在25℃下，从0％rh至80％rh观察到2.53％的水吸收，并且如图3的xrpd覆盖图所示，晶体形式在dvs之前和之后没有显示变化。根据dsc、tga和含水量的结果，推测乌洛地辛半-l-戊二酸盐是无水的。

14、溶解度研究

15、在室温(21～25℃)下，对三种结晶乌洛地辛盐在水、sgf、fassif和fessif中进行热力学溶解度研究24小时。溶解度研究程序如下：将适量的每种盐分别称重到2ml的玻璃小瓶中，接着加入0.4ml期望的载体(水、sgf、fassif和fessif)以形成悬浮液。然后，将所有样品涡旋30秒以均匀分散，并置于37℃下以200rpm的恒温振荡培养箱中24小时。如果api溶解，则将加入更多的物质以保持悬浮状态。在期望的时间点测试浓度、xrpd和ph。将结果概述提供如下：

16、

17、

18、在37℃下24小时，乌洛地辛半己二酸盐、乌洛地辛半琥珀酸盐和乌洛地辛半l-戊二酸盐均显示出高溶解度(～100mg/ml)。图4显示了在四种媒介物(水、sgf、fassif、fessif)中的溶解度研究中的乌洛地辛半-l-戊二酸盐样品的hplc覆盖图。

19、与初始固体形式相比，在水、fassif和fessif中的乌洛地辛半l-戊二酸盐的残留固体的xrpd图谱发生变化，并且基于溶解后在fassif中的残留固体的1h?nmr结果，证明其是游离碱(乌洛地辛)。

20、固态稳定性研究-半l-戊二酸盐

21、进行集中于固态稳定性潜力的进一步研究，以研究在60℃(密闭)和40℃/75％rh(开放)条件下，在2周期间乌洛地辛半l-戊二酸盐的物理和化学稳定性。对乌洛地辛半琥珀酸盐，也如此进行，以提供用于比较的手段。

22、固态稳定性的程序如下：分别将10mg的乌洛地辛半琥珀酸盐和乌洛地辛半l-戊二酸盐精确称重到40ml的透明玻璃小瓶中，然后，将样品小瓶置于相应的条件下。对于在湿度条件下开放的样品，无盖开放并用带针孔的铝箔覆盖；对于密闭的样品，它们都被封盖。

23、在0、1周和2周的时间点，将相应的样品抽样用于通过hplc测定纯度，以评估化学稳定性。此外，在用于外观和xrpd检查的相应条件下再制备一个样品，以评估物理稳定性。

24、固体稳定性研究的结果显示，在60℃和40℃/75％rh条件下，在2周期间，两种盐的外观和xrpd没有变化。半l-戊二酸盐的hplc研究结果呈现在图5中。对于60℃条件，在2周时间点，观察到两种盐的轻微降解(0.3％-0.4％)。在40℃/75％rh条件下，在2周期间，半l-戊二酸盐没有相关物质增加，而半琥珀酸盐降解0.16-0.3％。

25、基于纯度结果，在40℃/75％rh条件下，似乎乌洛地辛半l-戊二酸盐比乌洛地辛半琥珀酸盐在化学上更稳定。

26、结果显示在下表概述中：

27、*：xrpd：与初始时间的xrpd图谱相比较。

28、

29、半l-戊二酸盐具有良好的化学和物理稳定性，与在60℃和40℃/75％rh条件下2周没有外观和多晶型变化的半琥珀酸盐相比，其是非常有利的。在60℃的条件下2周，两种盐具有相当且非常轻微的降解(0.3％-0.4％)。

30、总之，申请人已经确定，总的来说，乌洛地辛半l-戊二酸盐比乌洛地辛半琥珀酸盐在化学上更稳定。

31、因此，申请人得出结论，尽管存在初始挑战，但是能够成功地制备半戊二酸盐晶体形式，并且相对于可得到的乌洛地辛盐证实良好的物理和化学性质。

32、因此，其可以是药物制剂加工中的有用候选物。

33、进一步研究稳定性，例如在可能的示例性制剂类型(例如水性制剂)范围内以及用于批量测试的放大生产的良好一致产率的潜力。

34、半l-戊二酸盐-水性制剂的稳定性

35、进行集中于新表征的盐的进一步研究，以提供用于支持水性静脉内(iv)制剂的稳定性数据。

36、所述制剂包含在纯水中的乌洛地辛半l-戊二酸盐，溶液浓度为0.1mg/ml。样品条件保持在21-25℃并避光。

37、研究程序如下：将6.4mg的化合物乌洛地辛半l-戊二酸盐称重到50ml的容量瓶中，超声处理直至溶解，并稀释至体积，目标浓度为0.10mg/ml(按游离碱计算)。通过将4ml的溶液转移到8ml的玻璃瓶中制备一式两份样品，并将所有样品在室温下置于黑暗中。在0、3、7、10和14天的期望时间点，通过hplc分析样品浓度并测量ph值。

38、结果显示，在室温下14天期间，观察到在水中0.1mg/ml(以游离碱计算)的乌洛地辛半l-戊二酸盐溶液样品的外观、浓度和纯度没有显著变化。所述制剂在物理和化学上稳定14天。

39、总之，确定了在室温下，乌洛地辛半l-戊二酸盐以0.1mg/ml(通过游离碱计算)在水中显示出良好的制剂稳定性14天，并且可能放大，其可用于支持动物研究，特别是静脉内(iv)制剂。

40、重复成盐过程(1g放大)

41、首先，重复半戊二酸盐形式的晶体盐的制备过程，以确定使用这种新建立的方法从游离形式提供盐是否可靠和一致，以产生足够的正确鉴定和纯的产物，用于放大。最初目的是获得1g的期望产物，并确定与早期分析产物数据的一致性。

42、向1g的乌洛地辛(1000.00mg，3.78mmol)在水(50ml)中的溶液中加入l-谷氨酸(278.36mg，1.89mmol)。在室温下，将混合物搅拌30分钟，然后冻干，得到1170.00mg的白色固体。将1170mg的乌洛地辛半l-戊二酸盐溶于5ml水中，然后加热至75℃，加入16ml的乙醇，并在该温度下搅拌30分钟以形成均匀溶液。然后，经1小时滴加40ml乙腈。然后，将混合物在该温度下搅拌1小时。经1小时，将混合物冷却至0℃。将混合物过滤，用乙腈洗涤滤饼并干燥，得到1010mg(1g)的白色固体。产率为79.0％。首先，如下通过lc-ms和nmr确认最终物质：

43、

44、然后，如前所述通过plm、xrpd、dsc和tga对其进行表征。

45、通过目测观察和双折射，乌洛地辛半-l-戊二酸盐为白色固体，在plm下，具有颗粒和不规则的块状形态。

46、图6中显示的xprd图谱表明最终化合物是具有不同衍射峰的晶体，并且该放大(1g)的半l-戊二酸盐的多晶型物与上表中提及的初步研究中得到的半l-戊二酸盐相同。不同衍射峰的信息见下表：

47、

48、如图7所示，在203.41℃下，dsc迹线显示一个单一熔点。在tga曲线上，从室温至195℃仅观察到0.971％的重量损失。确定1g的半l-戊二酸盐产物可能是无水物。此外，结晶度相对于初始结晶显著改善，进一步证明该盐在进一步的制剂测试中成为有用的候选物。在成功表征和选择新的盐(来自游离形式的乌洛地辛的半戊二酸盐)并验证所使用的重结晶方法导致该产物具有相同一致的物理和化学固体稳定性之后，研究了完整制备方法。

49、乌洛地辛半戊二酸盐的完整制备方法

50、为了证实所公开的完整制备方法产生相同的有用的盐产物(而不是从简单的乌洛地辛游离碱开始)，有必要遵循完整的乌洛地辛制备方法，包括重结晶游离形式产物，得到期望的盐。

51、特别地，重要的是通过这种方法可靠地获得最终的半戊二酸盐，目的是最终方法可用于获得更大的示范批次(适合于药理学加工)。

52、特别值得注意的是，鉴于本领域报道的先前技术挑战，重要的是确定可以可靠地制备游离形式的乌洛地辛，因为其对于新公开的半戊二酸盐的有效和可靠的重结晶是至关重要的。

53、首先，建立了完整方法的鉴别。以下是显示由碱性组分完全合成生产本发明的乌洛地辛半戊二酸盐cg689j的全加工步骤的方案：

54、合成路线

55、

56、申请人最初参照上述方案条件遵循上述步骤(和上文所述)：

57、步骤j-1

58、按照已知的方法进行羟基苄基化。

59、在所有结果中观察到cg689-sm2的聚合物(参见上文)，并且其是产率损失的主要原因。本技术人初步优化碱并替代bnoh作为溶剂，因为在延长的溶剂去除过程期间发生聚合物形成，然而最终不能鉴别更好的溶剂。

60、通过热过滤cg689g除去聚合物杂质，得到期望的中间体，产率～40％。

61、步骤j-2

62、使用化合物3的hcl盐，并在k2co3的存在下进行曼尼希反应。

63、步骤j-3

64、在氢解条件下72小时之后，成功地除去了cg689h上的苄基?；せ?。然而，挑战仍然是尽管添加了碱性添加剂(氢氧化铵溶液)，但是仍然获得的乌洛地辛呈盐酸盐而不是优选的游离碱，期望直接对游离碱产生新的盐。

65、在用离子交换树脂处理之后，获得了具有高hplc纯度和手性纯度(分别为98.3％、99.7％)的游离形式的乌洛地辛，产率～33％(经两个步骤)。

66、步骤j-4

67、根据之前描述的半戊二酸盐形成的重结晶方法进行最后的步骤。然而，尽管通?；竦昧宋诼宓匦涟胛於嵫?，但是盐酸盐的不完全解离产生盐形式的混合物。在用dsc量热计和xrpd检查时，结果与来自在之前描述的盐选择分析研究中产生的半戊二酸盐的发现不匹配。结论是，在重结晶之前，制备中的替代步骤对于产生具有可比较特征的正确盐形式将是必要的。

68、按照上述方案，对乌洛地辛生产方法进行了进一步的技术复查。本技术人注意到，盐酸乌洛地辛化合物3是早期生产游离形式的乌洛地辛cg689i中的关键组分。成功产生乌洛地辛的游离碱被鉴定为一个重要因素。

69、

70、在实验工作之后，本技术人确定，如果在步骤j-2中使用化合物3的游离碱(而不是hcl)作为反应配偶体，则随后在反应中加入碱不是必需的。lc-ms确定起始材料转化为cg689g＞95％。与以前使用的机制相比，该反应更有效并且导致更高的产物含量。重要的是，这种变化还避免了以前在j-4中看到的盐酸盐解离步骤(如上所述)。

71、使用该方法能够获得具有高hplc纯度和手性纯度(分别为99.1％、98.6％)的乌洛地辛游离形式cg689i。分析测试证实，通过修饰该先前的步骤，由乌洛地辛的完整制备方法再次可能实现由乌洛地辛可靠且一致地生产正确的半戊二酸盐cg689j。

72、示范批次的乌洛地辛半戊二酸盐(35g)

73、然后，期望通过这种新方法生产批量(35g)的戊二酸盐产物，以证明其用于药物加工和生物测试的潜力。

74、为此，使用替代的生产途径(使用游离形式的化合物3作为洛地辛方法中的反应配偶体)来制备乌洛地辛cg689i的游离碱，如修饰的方法中所述。此后，利用新确定的重结晶过程(本文上述“j”)制备最终的35g示范批次的期望的半戊二酸盐cg689j。

75、示范批次数据

76、 批次编号 量 hplc纯度 e.e 总产率 cp-0031535-13 34.9g 99.12％ 98.6％ 8.2％

77、示范批次1(35g)cp-0031535-13分析：

78、

79、总之，在两个批次中都以良好的产率获得了期望的产物乌洛地辛半戊二酸盐。证实得到的产物是化学纯的，并且盐的特征与先前盐选择研究中报道的一致。因此，据认为新鉴定和表征的乌洛地辛盐以及用于制备其的新生产方法是用于提供乌洛地辛药物和使用其治疗病症或疾病的高度有用的解决方案。

80、呈现前述实施例是为了说明本发明的目的，而不应当解释为对本发明的范围施加任何限制。容易显而易见的是，在不脱离本发明的基本原则下，可以对上述本发明的特定实施方案进行许多修饰和改变，并在实施例中进行说明。所有这样的修饰和改变都旨在被本技术所涵盖。