IL-21多肽和靶向构建体的制作方法

背景技术：

1、白介素-21(il-21)是调控先天性免疫细胞和适应性免疫细胞两者的活性的t细胞衍生的多效性细胞因子。il-21可加强t细胞存活和效应功能。白介素-21是作为用于癌症治疗的有前景的免疫治疗剂出现的i型细胞因子和共同细胞因子受体γ链(γc)家族成员。在一些情况下，由活化的cd4+t细胞和自然杀手t(nkt)细胞产生的il-21经由包含离散il-21受体(il-21r)亚基以及γc的异二聚受体复合物传导信号。在一些情况下，il-21r复合物的活化引起jak/stat信号通路的激活。il-21r在包括t淋巴细胞和b淋巴细胞、自然杀手(nk)细胞和骨髓细胞的造血细胞中广泛表达。il-21是用于nk细胞和活化t细胞两者的强效促分裂原和存活因子。il-21可支持cd4+t辅助17(th17)细胞以及滤泡性辅助t细胞(tfh)分化并且可拮抗调控t细胞(treg)分化。另外，il-21可加强cd8+t细胞存活率，从而产生较弱活化但更加持久的t细胞表型以引起增强的肿瘤和病毒控制。细胞因子免疫疗法的挑战在于在一些情况下，尽管激活免疫细胞以增强免疫反应，但相同细胞因子也可激活如通过il-2和ifnγ所示例的反调控途径。这些反调控途径可激活调控t细胞反应和抑制途径。因为其在抗肿瘤反应和抗病毒反应中起关键作用，所以除了对导致自身免疫疾病和炎症性疾病发展的炎症反应发挥重要作用之外，il-21也已为若干疗法的吸引性目标。

2、仍需要利用il-21的治疗模态，包括合并将il-21导引至特异性细胞类型的il-21部分的模态。

技术实现思路

1、在本公开的一个实施方案中，本文提供了il-21多肽或其功能片段或变体，其包含与seq?id?no:1具有至少80％序列同一性的多肽序列，其中所述il-21多肽的等电点相较于具有seq?id?no:1的序列的野生型il-21蛋白的等电点低至少约0.6个单位至约5个单位。在一些实施方案中，seq?id?no:1的等电点为约9.42。在一些实施方案中，所述il-21多肽的等电点为约7.12至约8.72。在一些实施方案中，当施用于受试者时，所述多肽提供相较于野生型il-21蛋白改善的暴露，如相对于野生型il-21的曲线下面积(auc)在等效浓度下所述多肽的曲线下面积(auc)大至少约1.5倍所测量。在一些实施方案中，所述il-21多肽包含至少一个氨基酸取代，使所述il-21多肽的等电点相对于不具有所述氨基酸取代的人类il-21多肽降低约0.6个单位至约5个单位。在一些实施方案中，所述il-21多肽包含至少四个氨基酸取代，使所述il-21多肽的等电点相对于不具有所述氨基酸取代的人类il-21多肽降低约0.6个单位至约5个单位。在一些实施方案中，所述il-21多肽包含至多10、11、12、13、14、15、16、17、18、19或20个降低等电点的氨基酸取代。

2、在一些实施方案中，本公开提供了il-21多肽或其功能片段或变体，其中相对于人类il-21多肽的包含约2至20个带正电氨基酸残基的区域，所述il-21多肽包含所述约2至20个带正电氨基酸残基的至少一个氨基酸取代。在一些实施方案中，人类il-21多肽的所述区域不包括结合人类il-21受体的氨基酸残基。在一些实施方案中，人类il-21多肽的所述区域含有包含seq?id?no:1的人类il-21多肽的氨基酸残基s80至t92。在一些实施方案中，本公开提供了il-21多肽或其功能片段或变体，其中人类il-21多肽在人类il-21多肽的三维结构中在人类il-21多肽的表面上包含至少一个带正电氨基酸残基，所述至少一个带正电氨基酸残基不直接与人类il-21受体相互作用或结合人类il-21受体，并且其中所述il-21多肽包含所述至少一个带正电氨基酸残基的至少一个氨基酸取代。在一些实施方案中，本公开提供了不包含在包含seq?id?no:1的人类il-21多肽的g84处的氨基酸取代的il-21多肽。

3、在一些实施方案中，所述il-21多肽包含在选自由seq?id?no:1的k56、t81、n82、a83、g84、r85、r86、q87、k88、h89、r90、l91和t92组成的组的一个或多个位置处的突变。在一些实施方案中，所述il-21多肽包含在选自由seq?id?no:1的s80、t81、n82、a83、g84、r85、r86、q87、k88、h89、r90、l91和t92组成的组的一个或多个位置处的突变(例如氨基酸取代)。在一些实施方案中，所述il-21多肽包含在选自seq?id?no:1的s80、t81、n82、a83、r85、r86、q87、k88、h89、r90、l91或t92的位置处的4、5、6、7、8、9、10、11或12个氨基酸取代。在一些实施方案中，所述il-21多肽包含选自s80g、t81g、n82g、n82e、a82g、a83e、a83s、r85g、r85e、r85s、r86g、r86e、q87g、q87e、q87s、k88g、h89g、h89s、r90g、r90s、r90e、r90a、l91g、l91s、t92g、t92s的4、5、6、7、8、9、10、11或12个氨基酸取代。在一些实施方案中，所述il-21多肽包含(a)r85g、r86g、k88g和r90e或(b)s80g、t81g、n82e、a83g、r85g、r86g、q87g、k88g、h89g、r90e、l91g和t92g。在一些实施方案中，本公开提供了不包含在包含seq?id?no:1的人类il-21多肽的g84处的氨基酸取代的il-21多肽。

4、在一些实施方案中，本公开提供了il-21多肽或其功能片段或变体，其包含以下氨基酸序列：qgqdrhmirmrqlidivdqlknyvn?dlvpeflpapedvetncewsafscfqkaqlksantgnneriinvsi?kklkrkppx1x2x3x4gx5x6x7x8x9x10x11x12cpscdsyekkppkeflerfksllqkmihqhlssrthgseds(seq?id?no:380)，其中x1＝g、s；x2＝g、t；x3＝g、e、n；x4＝g、s、e、a；x5＝g、e、s、r；x6＝g、e、r；x7＝s、g、e、q；x8＝g、k；x9＝g、s、h；x10＝a、e、s、g、r；x11＝s、g、l；并且x12＝g、s、t，条件是x5、x6、x8、x9和x10中的至少一者不为在seq?id?no:1中所示的同一位置处的氨基酸残基，任选地其中：

5、(i)x5＝g，x6＝g，x8＝g，x10＝a；

6、(ii)x5＝g，x6＝g，x8＝g，x10＝e；

7、(iii)x1＝g，x2＝g，x3＝g，x4＝s，x5＝e，x6＝g，x7＝s，x8＝g，x9＝g，x10＝s；

8、(iv)x1＝g，x2＝g，x3＝g，x4＝s，x5＝g，x6＝g，x7＝s，x8＝g，x9＝g，x10＝e；

9、(v)x5＝g，x6＝g，x7＝s，x8＝g，x9＝g，x10＝e；

10、(vi)x5＝g，x6＝g，x7＝s，x8＝g，x9＝g，x10＝s；

11、(vii)x5＝g，x6＝g，x7＝g，x8＝g，x9＝g，x10＝e；

12、(viii)x5＝g，x6＝g，x7＝g，x8＝g，x9＝g，x10＝g；

13、(ix)x5＝g，x6＝g，x7＝e，x8＝g，x9＝g，x10＝g；

14、(x)x1＝g，x2＝g，x3＝g，x4＝s，x5＝g，x6＝g，x7＝s，x8＝g，x9＝g，x10＝g，x11＝s，x12＝g；

15、(xi)x1＝g，x2＝g，x3＝g，x4＝g，x5＝g，x6＝g，x7＝g，x8＝g，x9＝g，x10＝g，x11＝g，x12＝g；

16、(xii)x1＝g，x2＝g，x3＝g，x4＝s，x5＝g，x6＝g，x7＝e，x8＝g，x9＝g，x10＝g，x11＝s，x12＝g；

17、(xiii)x1＝g，x2＝g，x3＝g，x4＝e，x5＝g，x6＝g，x7＝e，x8＝g，x9＝g，x10＝g，x11＝s，x12＝g；

18、(xiv)x3＝g，x4＝g，x5＝s，x6＝g，x7＝g，x8＝g，x9＝s，x10＝g，x11＝g，x12＝s；

19、(xv)x3＝g，x4＝g，x5＝e，x6＝g，x7＝g，x8＝g，x9＝s，x10＝g，x11＝g，x12＝s；

20、(xvi)x1＝g，x2＝g，x3＝g，x4＝g，x5＝e，x6＝g，x7＝g，x8＝g，x9＝g，x10＝g，x11＝g，x12＝g；

21、(xvii)x1＝g，x2＝g，x3＝g，x4＝s，x5＝g，x6＝g，x7＝s，x8＝g，x9＝g，x10＝e，x11＝g，x12＝g；

22、(xviii)x1＝g，x2＝g，x3＝g，x4＝g，x5＝g，x6＝g，x7＝g，x8＝g，x9＝g，x10＝e，x11＝g，x12＝g；

23、(xix)x3＝g，x4＝g，x5＝s，x6＝g，x7＝g，x8＝g，x9＝s，x10＝e，x11＝g，x12＝s；

24、(xx)x3＝g，x4＝g，x5＝g，x6＝g，x7＝g，x8＝g，x9＝g，x10＝e，x11＝g，x12＝g；

25、(xxi)x5＝g，x6＝g，x7＝g，x8＝g，x9＝g，x10＝e，x11＝g；

26、(xxii)x3＝g，x4＝g，x5＝g，x6＝g，x7＝g，x8＝g，x9＝g，x10＝e，x11＝g；

27、(xxiii)x3＝g，x4＝g，x5＝g，x6＝e，x7＝g，x8＝g，x9＝g，x10＝e，x11＝g；

28、(xxiv)x3＝g，x4＝g，x5＝e，x6＝g，x7＝g，x8＝g，x9＝g，x10＝e，x11＝g；

29、(xxv)x1＝g，x2＝g，x3＝g，x4＝e，x5＝g，x6＝g，x7＝g，x8＝g，x9＝g，x10＝e，x11＝g，x12＝g；或

30、(xxvi)x1＝g，x2＝g，x3＝e，x4＝g，x5＝g，x6＝g，x7＝g，x8＝g，x9＝g，x10＝e，x11＝g，x12＝g。在一些实施方案中，本公开提供了不包含在包含seq?id?no:1的人类il-21多肽的g84处的氨基酸取代的il-21多肽。

31、在一些实施方案中，本公开提供了il-21多肽或其功能片段或变体，其包含与选自seq?id?no:2、4-15和23-40的氨基酸序列至少90％、约95％、约96％、约97％、约98％或约99％同一的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述il-21多肽包含选自seq?id?no:2、4-15和23-40的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述il-21多肽包含seq?id?no:40的氨基酸序列。

32、在一些实施方案中，本公开提供了il-21多肽或其功能片段或变体，其包含至少一个氨基酸取代，使与人类il-21受体的结合相较于人类il-21多肽的结合有所减少。在一些实施方案中，所述至少一个氨基酸取代是在seq?id?no:1的位置r5、i8、r9、r11、l13、i14、i16、v17、d18、k72、k73、l74、k75、r76、k77或k117处的一个或多个氨基酸残基。在一些实施方案中，所述至少一个氨基酸取代选自：r5f、r5a、r5e、r5s、r5t、r5n、r5q、r5v、r5i、r5l、r5y、i8e、r9a、r9d、r9e、r9h、r9s、r9t、r9n、r9g、r9v、r9i、r9l、r9y、r11d、r11e、l13f、l13r、i14d、i16a、i16s、i16r、v17i、v17a、d18a、k72a、k72e、k73a、k73e、k75a、k75e、l74i、l74f、l74m、l74v、r76e、r76f、r76a、r76n、r76d、r76s、r76t、r76q、r76v、r76i、r76l、r76y、r76m、k77a、k77e和k117a。在一些实施方案中，所述至少一个氨基酸取代为r76e或r76q。在一些实施方案中，所述il-21多肽包含在选自由seq?id?no:1的r5、i8、r9、r11、q12、i14、d15、d18、q19、y23、r65、s70、k72、k73、k75、r76、k77、s80、q116和k117组成的组的位置处的突变。在一些实施方案中，所述il-21多肽包含与seq?id?no:2、seq?id?no:4、seq?id?no:5、seq?idno:6、seq?id?no:7、seq?id?no:8、seq?id?no:9、seq?id?no:10、seq?id?no:11、seq?id?no:12、seq?id?no:13、seq?id?no:14或seq?id?no:15的序列至少约85％、约90％、约95％、约96％、约97％、约98％、约99％或约100％同一的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述il-21多肽包含与seq?id?no:16、seq?id?no:17、seq?id?no:18、seq?id?no:19、seq?id?no:20或seq?id?no:21的序列至少约85％、约90％、约95％、约96％、约97％、约98％、约99％或约100％同一的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述il-21多肽包含与选自seq?id?no:2、4-15和23-40的序列至少约85％、约90％、约95％、约96％、约97％、约98％、约99％或约100％同一的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述il-21多肽包含与选自seq?id?no:16-21、41-98和374-379的序列至少约85％、约90％、约95％、约96％、约97％、约98％、约99％或约100％同一的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述il-21多肽包含与选自seq?id?no:16-21、41-93和374-379的序列至少约85％、约90％、约95％、约96％、约97％、约98％、约99％或约100％同一的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述il-21多肽包含与选自seq?id?no:94-98的序列至少约85％、约90％、约95％、约96％、约97％、约98％、约99％或约100％同一的氨基酸序列。

33、在本公开的一个实施方案中，本文提供了一种包含根据本公开的il-21多肽或其功能片段或变体和抗体或其抗原结合片段的靶向细胞因子构建体。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段特异性结合至cd8+t细胞。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段特异性结合至cd8α、cd8αα或cd8αβ中的至少一者。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段特异性结合至cd8β。

34、在本公开的一个实施方案中，本文提供了靶向细胞因子构建体，其包含：a)包含氨基酸序列与seq?id?no:1至少80％同一的il-21多肽或其功能片段或变体；和b)特异性结合至cd8α、cd8αα或cd8αβ中的至少一者的抗体或其抗原结合片段。

35、在本公开的一个实施方案中，本文提供了一种靶向细胞因子构建体，其包含：a)包含氨基酸序列与seq?id?no:1至少80％同一的il-21多肽或其功能片段或变体；和b)特异性结合至cd8β的抗体或其抗原结合片段。

36、在一些实施方案中，所述il-21多肽包含在seq?id?no:1的一个或多个氨基酸位置处的突变。在一些实施方案中，所述il-21多肽包含在选自由seq?id?no:1的k56、t81、n82、a83、g84、r85、r86、q87、k88、h89、r90、l91和t92组成的组的一个或多个位置处的突变。在一些实施方案中，所述il-21多肽包含在选自由seq?id?no:1的r5、i8、r9、r11、q12、i14、d15、d18、q19、y23、r65、s70、k72、k73、k75、r76、k77、s80、q116和k117组成的组的位置处的突变。在一些实施方案中，所述il-21多肽或其功能片段或变体包含与seq?id?no:2、seq?id?no:4、seq?id?no:5、seq?id?no:6、seq?id?no:7、seq?id?no:8、seq?id?no:9、seq?id?no:10、seq?id?no:11、seq?id?no:12、seq?id?no:13、seq?id?no:14或seq?id?no:15的序列至少约85％、约90％、约95％、约96％、约97％、约98％、约99％或约100％同一的氨基酸序列。

37、在一些实施方案中，所述il-21多肽或其功能片段或变体包含与seq?id?no:16、seq?id?no:17、seq?id?no:18、seq?id?no:19、seq?id?no:20或seq?id?no:21的序列至少约85％、约90％、约95％、约96％、约97％、约98％、约99％或约100％同一的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述构建体以相较于nk细胞或cd4+t细胞的激活至少约10倍或更大的效力激活cd8+t细胞。在一些实施方案中，所述构建体以相较于nk细胞或cd4+t细胞的激活大至少约10倍至约100,000倍的效力激活cd8+t细胞。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含：i)第一多肽，其从n端至c端排列包含：可变轻链(vl)氨基酸序列和轻链恒定区氨基酸序列(cl1)；ii)第二多肽，其从n端至c端排列包含：可变重链(vh)氨基酸序列、重链ch1恒定区氨基酸序列、铰链区氨基酸序列、重链ch2恒定区氨基酸序列和重链ch3恒定区氨基酸序列；iii)第三多肽，其从n端至c端排列包含：铰链区氨基酸序列、重链ch2恒定区氨基酸序列和重链ch3恒定区氨基酸序列，其中所述第二多肽和所述第三多肽各自的ch2域和ch3域形成fc域。在一些实施方案中，所述第三多肽从n端至c端排列包含：可变重链(vh)氨基酸序列、重链ch1恒定区氨基酸序列、铰链区氨基酸序列、重链ch2恒定区氨基酸序列、重链ch3恒定区氨基酸序列，其中所述抗体或其抗原结合片段还包含：iv)第四多肽，其从n端至c端排列包含：可变轻链(vl)氨基酸序列和轻链恒定氨基酸序列(cl1)。在一些实施方案中，所述il-21多肽或其功能片段或变体和所述抗体或其抗原结合片段彼此可操作地连接。在一些实施方案中，所述il-21多肽或其功能片段或变体与所述抗体或其抗原结合片段的n端或c端连接。在一些实施方案中，所述il-21多肽或其功能片段或变体与所述第二多肽或所述第三多肽的c端缀合。在一些实施方案中，所述靶向细胞因子构建体包含il-21多肽的至少一个分子。在一些实施方案中，所述fc域为人类igg?fc域。在一些实施方案中，所述fc域为igg1、igg2、igg3或igg4?fc域。在一些实施方案中，所述fc域包含促进异二聚化的一个或多个修饰。在一些实施方案中，所述第二多肽在ch2域或ch3域中包含杵(knob)修饰，并且所述第三多肽在ch2域或ch3域中包含臼(hole)修饰；或者其中所述第三多肽在ch2域或ch3域中包含杵修饰，并且所述第二多肽在ch2或ch3中包含臼修饰。在一些实施方案中，所述第二多肽和所述第三多肽中的至少一者包含以下突变：根据eu索引编号的l234a、l235a和g237a。

38、在本公开的一个实施方案中，本文提供了一种靶向细胞因子构建体，其包含：a)包含氨基酸序列与seq?id?no:1至少80％同一的il-21多肽或其功能片段或变体；和b)包含第一抗原结合臂和第二抗原结合臂的抗体或其抗原结合片段，其中所述第一抗原结合臂和所述第二抗原结合臂结合至两种不同抗原，其中所述第一抗原结合臂和所述第二抗原结合臂中的至少一者特异性结合至cd8α、cd8αα、cd8αβ。

39、在本公开的一个实施方案中，本文提供了一种靶向细胞因子构建体，其包含：a)包含氨基酸序列与seq?id?no:1至少80％同一的il-21多肽或其功能片段或变体；和b)包含第一抗原结合臂和第二抗原结合臂的抗体或其抗原结合片段，其中所述第一抗原结合臂和所述第二抗原结合臂结合至两种不同抗原，其中所述第一抗原结合臂和所述第二抗原结合臂中的至少一者特异性结合至cd8β。在一些实施方案中，所述靶向细胞因子构建体以相较于nk细胞或cd4+t细胞的激活至少约10倍或更大的效力激活cd8+t细胞。在一些实施方案中，靶向细胞因子构建体以相较于nk细胞或cd4+t细胞的激活大至少约10倍至约100,000倍的效力激活cd8+t细胞。在一些实施方案中，所述il-21多肽或其功能片段或其变体包含在选自由seq?id?no:1的k56、t81、n82、a83、r85、g84、r86、q87、k88、h89、r90、l91和t92组成的组的位置处的突变。在一些实施方案中，所述il-21多肽或其功能片段或其变体包含在选自由seq?id?no:1的r5、i8、r9、r11、q12、i14、d15、d18、q19、y23、r65、s70、k72、k73、k75、r76、k77、s80、q116和k117组成的组的位置处的突变。在一些实施方案中，所述il-21多肽或其功能片段或变体包含与seq?id?no:2、seq?id?no:4、seq?id?no:5、seq?id?no:6、seq?id?no:7、seq?id?no:8、seq?id?no:9、seq?id?no:10、seq?id?no:11、seq?id?no:12、seq?id?no:13、seq?id?no:14或seq?id?no:15的序列至少约85％、约90％、约95％、约96％、约97％、约98％、约99％或约100％同一的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述il-21多肽或其功能片段或变体包含与seq?id?no:16、seq?id?no:17、seq?id?no:18、seq?id?no:19、seq?id?no:20或seq?id?no:21的序列至少约85％、约90％、约95％、约96％、约97％、约98％、约99％或约100％同一的氨基酸序列。

40、在一些实施方案中，本公开提供了一种融合蛋白，所述融合蛋白包含：

41、a)包含以下的il-21多肽：(i)提供相对于包含seq?id?no:1的人类il-21多肽降低的等电点的一个或多个氨基酸取代，其中所述一个或多个氨基酸取代是在seq?id?no:1的s80至t92内，其中至少一个氨基酸取代是在残基r85、r86、k88、h89、r90或其组合处；和(ii)提供相对于所述人类il-21多肽的结合减少的与人类il-21受体的结合的至少一个氨基酸取代；和

42、b)特异性结合至cd8αβ或cd8β的抗体或其抗原结合片段。在一些实施方案中，所述il-21多肽不包含g84取代。在一些实施方案中，提供减少结合的至少一个氨基酸取代为r76e或r76q。

43、在一些实施方案中，本公开提供了一种融合蛋白，所述融合蛋白包含：

44、a)包含以下的il-21多肽：(i)提供相对于包含seq?id?no:1的人类il-21多肽降低的等电点的四个或更多个氨基酸取代，其中所述四个或更多个氨基酸取代是在seq?id?no:1的s80至t92内，其中至少四个氨基酸取代是在残基r85、r86、k88、h89、r90或其组合处；和(ii)提供相对于所述人类il-21多肽的结合减少的与人类il-21受体的结合的至少一个氨基酸取代；和

45、b)特异性结合至cd8αβ或cd8β的抗体或其抗原结合片段。

46、在一些实施方案中，本公开提供了一种融合蛋白，所述融合蛋白包含：

47、a)包含以下的il-21多肽：(i)提供相对于包含seq?id?no:1的人类il-21多肽降低的等电点的四个或更多个氨基酸取代，其中所述四个或更多个氨基酸取代是在seq?id?no:1的s80至t92内，其中至少四个氨基酸取代是在残基r85、r86、k88、h89、r90或其组合处；和(ii)提供相对于所述人类il-21多肽的结合减少的与人类il-21受体的结合的至少一个氨基酸取代，其中所述至少一个氨基酸取代是在选自r5、i8、r9、r11、l13、i14、i16、v17、d18、k72、k73、l74、k75、r76、k77、k117和其组合的残基处；和

48、b)特异性结合至cd8αβ或cd8β的抗体或其抗原结合片段。

49、在一些实施方案中，本公开提供了一种融合蛋白，所述融合蛋白包含：

50、a)包含以下的il-21多肽：(i)提供相对于包含seq?id?no:1的人类il-21多肽降低的等电点的四个或更多个氨基酸取代，其中所述四个或更多个氨基酸取代是在seq?id?no:1的s80至t92内，其中至少四个氨基酸取代是在残基r85、r86、k88、h89、r90或其组合处；和(ii)选自以下的至少一个氨基酸取代：(a)r11d；(b)r11e；(c)i14d、d18a和k117a；(d)r76e；(e)r5f；(f)r76f；(g)i8e；(h)r5a；(i)r5e；(j)r5s；(k)r5t；(l)r5n；(m)r5q；(n)r5v；(o)r5i；(p)r5l；(q)r5y；(r)r76a；(s)r76n；(t)r76d；(u)r76s；(v)r76t；(w)r76q；(x)r76v；(y)r76i；(z)r76l；(aa)r76y；(bb)k77a；(cc)k77e；(dd)k72a；(ee)k72e；(ff)k75a；(gg)k75e；(hh)k73a；(ii)k73e；(jj)r5f和k77a；(kk)r5f和k77e；(ll)r5f和k72a；(mm)r5f和k72e；(nn)r5f和k76a；(oo)r5f和k76e；(pp)k73a和k76f；(qq)k73e和k76f；(rr)r9a；(ss)r9d；(tt)r9e；(uu)r9h；(vv)r9s；(ww)r9t；(xx)r9n；(zz)r9g；(aaa)r9v；(bbb)r9i；(ccc)r9l；(ddd)r9y；(eee)k72a和r76f；(fff)k75a和r76f；(ggg)r76f和k77a；(hhh)k75e和r76f；(iii)v17i和l74i；(jjj)i16a和l74f；(kkk)i16s、v17i和l74v；(lll)i16r、v17i和l74i；(mmm)l13f、i16a、v17a和l74m；和(nnn)l13r、i16a、v17i和l74i；和

51、b)特异性结合至cd8αβ或cd8β的抗体或其抗原结合片段。

52、在一些实施方案中，本公开提供了一种融合蛋白，所述融合蛋白包含：

53、a)包含以下的il-21多肽：(i)提供相对于包含seq?id?no:1的人类il-21多肽降低的等电点的四个或更多个氨基酸取代，其中所述四个或更多个氨基酸取代是在残基s80、t81、n82、a83、r85、r86、q87、k88、h89、r90、l91、t92或其组合处；和(ii)提供相对于所述人类il-21多肽的结合减少的与人类il-21受体的结合的至少一个氨基酸取代，其中所述至少一个氨基酸取代是在选自r5、i8、r9、r11、l13、i14、i16、v17、d18、k72、k73、l74、k75、r76、k77、k117和其组合的残基处；和

54、b)特异性结合至cd8αβ或cd8β的抗体或其抗原结合片段。

55、在一些实施方案中，本公开提供了一种融合蛋白，所述融合蛋白包含：

56、a)包含以下的il-21多肽：(i)提供相对于包含seq?id?no:1的人类il-21多肽降低的等电点的四个或更多个氨基酸取代，其中所述四个或更多个氨基酸取代是在残基s80、t81、n82、a83、r85、r86、q87、k88、h89、r90、l91、t92或其组合处；和(ii)提供相对于所述人类il-21多肽的结合减少的与人类il-21受体的结合的至少一个氨基酸取代，其中所述至少一个氨基酸取代是在残基r76处；和

57、b)特异性结合至cd8αβ或cd8β的抗体或其抗原结合片段。

58、在一些实施方案中，本公开提供了一种融合蛋白，所述融合蛋白包含：

59、a)包含以下的il-21多肽：(i)选自seq?id?no:2、4-15和23-40的氨基酸序列，和(ii)提供相对于人类il-21多肽的结合减少的与人类il-21受体的结合的至少一个氨基酸取代；和

60、b)特异性结合至cd8αβ或cd8β的抗体或其抗原结合片段。

61、在一些实施方案中，本公开提供了一种融合蛋白，所述融合蛋白包含：

62、a)包含以下的il-21多肽：(i)选自seq?id?no:2、4-15和23-40的氨基酸序列，和(ii)提供相对于人类il-21多肽的结合减少的与人类il-21受体的结合的至少一个氨基酸取代，其中所述至少一个氨基酸取代是在选自r5、i8、r9、r11、l13、i14、i16、v17、d18、k72、k73、l74、k75、r76、k77、k117和其组合的残基处；和

63、b)特异性结合至cd8αβ或cd8β的抗体或其抗原结合片段。

64、在一些实施方案中，本公开提供了一种融合蛋白，所述融合蛋白包含：

65、a)包含以下的il-21多肽：(i)选自seq?id?no:2、4-15和23-40的氨基酸序列，和(ii)提供相对于人类il-21多肽的结合减少的与人类il-21受体的结合的至少一个氨基酸取代，其中所述至少一个氨基酸取代是在残基r76处；和

66、b)特异性结合至cd8αβ或cd8β的抗体或其抗原结合片段。

67、在一些实施方案中，所述il-21多肽和所述抗体或其抗原结合片段经由接头彼此连接。在一些实施方案中，所述il-21多肽与所述抗体或其抗原结合片段的n端或c端连接。在一些实施方案中，所述il-21多肽与所述抗体或其抗原结合片段的c端连接。

68、在一些实施方案中，本公开提供了一种融合蛋白，所述融合蛋白包含：

69、a)包含vl链和cl1链的第一多肽；

70、b)包含vh链和hc恒定域的第二多肽，其中il-21多肽可操作地连接至所述hc恒定域的c端，并且其中所述hc恒定域包含杵修饰；

71、c)包含vh链和hc恒定域的第三多肽，其中所述hc恒定域包含臼修饰，并且其中所述第二多肽和所述第三多肽的所述vh链是相同的；和

72、d)包含vl链和cl1链的第四多肽，其中所述第一多肽和所述第四多肽的所述vl链是相同的，并且

73、其中所述vh链和所述vl链包含特异性结合至cd8αβ或cd8β的cdr，

74、其中所述il-21多肽包含(i)提供相对于包含seq?id?no:1的人类il-21多肽降低的等电点的一个或多个氨基酸取代，其中所述一个或多个氨基酸取代是在seq?id?no:1的s80至t92内，其中至少一个氨基酸取代是在残基r85、r86、k88、h89、r90或其组合处；和(ii)提供相对于所述人类il-21多肽的结合减少的与人类il-21受体的结合的至少一个氨基酸取代。

75、在一些实施方案中，本公开提供了一种融合蛋白，所述融合蛋白包含：

76、a)包含vl链和cl1链的第一多肽；

77、b)包含vh链和hc恒定域的第二多肽，其中所述hc恒定域包含杵修饰；

78、c)包含vh链和hc恒定域的第三多肽，其中il-21多肽可操作地连接至所述hc恒定域的c端，其中所述hc恒定域包含臼修饰，并且其中所述第二多肽和所述第三多肽的所述vh链是相同的；和

79、d)包含vl链和cl1链的第四多肽，其中所述第一多肽和所述第四多肽的所述vl链是相同的，并且

80、其中所述vh链和所述vl链包含特异性结合至cd8αβ或cd8β的cdr，

81、其中所述il-21多肽包含(i)提供相对于包含seq?id?no:1的人类il-21多肽降低的等电点的一个或多个氨基酸取代，其中所述一个或多个氨基酸取代是在seq?id?no:1的s80至t92内，其中至少一个氨基酸取代是在残基r85、r86、k88、h89、r90或其组合处；和(ii)提供相对于所述人类il-21多肽的结合减少的与人类il-21受体的结合的至少一个氨基酸取代。

82、在本公开的一个实施方案中，本文提供了一种编码根据权利要求1-8中任一项所述的il-21多肽或其功能片段或变体的多核苷酸。

83、在本公开的一个实施方案中，本文提供了一种编码靶向细胞因子构建体的多核苷酸，所述靶向细胞因子构建体包含根据本公开的il-21多肽或其功能片段或变体和抗体或其抗原结合片段，所述多核苷酸包含il-21多肽的编码序列和所述抗体或其抗原结合片段的编码序列。

84、在本公开的一个实施方案中，本文提供了一种包含本公开的多核苷酸的载体。

85、在本公开的一个实施方案中，本文提供了一种包含本公开的多核苷酸或载体的宿主细胞。

86、在本公开的一个实施方案中，本文提供了一种包含根据本公开的il-21多肽或其功能片段或变体和药学上可接受的载剂的药物组合物。

87、在本公开的一个实施方案中，本文提供了包含根据本公开的靶向细胞因子构建体和药学上可接受的载剂的药物组合物。

88、在本公开的一个实施方案中，本文提供了一种用于选择性激活cd8+t细胞的方法，其中所述方法包括使包含cd8+t细胞、cd4+t细胞和nk细胞的细胞群体与根据本公开的靶向细胞因子构建体接触。在一些实施方案中，所述选择性激活包括在细胞群体中以相较于nk细胞或cd4+t细胞的激活至少约10倍或更大的效力激活cd8+t细胞。在一些实施方案中，所述选择性激活包括在细胞群体中以相较于nk细胞或cd4+t细胞的活化大至少约10倍至约100,000倍的效力激活cd8+t细胞。在一些实施方案中，cd8+t细胞的选择性激活导致细胞群体中的cd8+t细胞的stat3磷酸化相较于nk细胞或cd4+t细胞的stat3磷酸化有所增加。

89、在本公开的一个实施方案中，本文提供了一种治疗受试者的疾病的方法，所述方法包括施用根据本公开的il-21多肽或其功能片段或变体、本文所描述的靶向细胞因子构建体或根据本公开的药物组合物。在一些实施方案中，所述方法还包含额外治疗剂。在一些实施方案中，所述疾病包括癌症或慢性感染。在一些实施方案中，所述疾病包括癌症并且其中所述癌症是急性淋巴母细胞性白血病(all)(包括非t细胞all)、急性髓系白血病、b细胞前淋巴细胞白血病、b细胞急性淋巴性白血病(“ball”)、母细胞性浆细胞样树突状细胞赘瘤、伯基特氏淋巴瘤(burkitt's?lymphoma)、慢性淋巴细胞白血病(cll)、慢性骨髓性白血病(cml)、慢性髓系白血病、慢性或急性白血病、弥漫性大b细胞淋巴瘤(dlbcl)、滤泡性淋巴瘤(fl)、毛细胞白血病、霍奇金病(hodgkin's?disease)、恶性淋巴增生性疾患、malt淋巴瘤、套细胞淋巴瘤、边缘区淋巴瘤、意义不明单克隆丙种球蛋白病(mgus)、多发性骨髓瘤、脊髓发育不良和脊髓发育不良综合征、非霍奇金淋巴瘤(nhl)、浆细胞增生性病症(包括无症状骨髓瘤(郁积型多发性骨髓瘤或惰性骨髓瘤))、浆母细胞性淋巴瘤、浆细胞样树突状细胞赘瘤、浆细胞瘤(包括浆细胞恶液质；孤立骨髓瘤；孤立浆细胞瘤；髓外浆细胞瘤；和多发性浆细胞瘤)、poems综合征(也称为克罗-富克斯综合征(crow-fukase?syndrome)；takatsuki??；和pep综合征)、原发性纵隔大b细胞淋巴瘤(pmbc)、小细胞或大细胞滤泡性淋巴瘤、脾边缘区淋巴瘤(smzl)、全身淀粉样蛋白轻链淀粉样变性病、t细胞急性淋巴性白血病(“tall”)、t细胞淋巴瘤、转化型滤泡性淋巴瘤或华氏巨球蛋白血症(waldenstrommacroglobulinemia)、套细胞淋巴瘤(mcl)、转化型滤泡性淋巴瘤(tfl)、原发性纵隔b细胞淋巴瘤(pmbcl)、多发性骨髓瘤、毛细胞淋巴瘤/白血病、肺癌、小细胞肺癌、非小细胞肺(nscl)癌、细支气管肺泡细胞肺癌、鳞状细胞癌、肺腺癌、鳞状肺癌、腹膜癌、头颈癌、骨癌、胰腺癌、皮肤癌、头颈癌、皮肤或眼内黑色素瘤、甲状腺癌、子宫癌、胃肠癌、卵巢癌、直肠癌、肛门区癌、胃部癌、胃癌、结肠癌、乳腺癌、子宫内膜癌、子宫癌、输卵管癌、宫颈癌、阴道癌、外阴癌、霍奇金病、食道癌、小肠癌、内分泌系统癌、甲状腺癌、甲状旁腺癌、肾上腺癌、软组织肉瘤、尿道癌、阴茎癌、前列腺癌、膀胱癌、肾或输尿管癌、肾细胞癌、肾盂癌、间皮瘤、膀胱癌、肝癌、肝肿瘤、肝细胞癌、宫颈癌、唾液腺癌、胆管癌、中枢神经系统(cns)赘瘤、脊髓轴肿瘤、脑干神经胶质瘤、多形性神经胶质母细胞瘤、星形细胞瘤、神经鞘瘤、室管膜瘤、髓母细胞瘤、脑膜瘤、鳞状细胞癌、垂体腺瘤和尤文氏肉瘤(ewing's?sarcoma)，包括以上癌症中任一者的难治性型式，或以上癌症中一者或多者的组合。

90、在一些实施方案中，所述抗体或抗原结合片段包含重链可变(vh)域和轻链可变(vl)域；并且其中：(a)所述vh域包含：包含seq?id?no:137的氨基酸序列的cdr-h1、包含seqid?no:138的氨基酸序列的cdr-h2和包含seq?id?no:139的氨基酸序列的cdr-h3；并且其中所述vl域包含：包含seq?id?no:140的氨基酸序列的cdr-l1、包含seq?id?no:141的氨基酸序列的cdr-l2和包含seq?id?no:142的氨基酸序列的cdr-l3；(b)所述vh域包含：包含seqid?no:149的氨基酸序列的cdr-h1、包含seq?id?no:150的氨基酸序列的cdr-h2和包含seqid?no:151的氨基酸序列的cdr-h3；并且其中所述vl域包含：包含seq?id?no:152的氨基酸序列的cdr-l1、包含seq?id?no:153的氨基酸序列的cdr-l2和包含seq?id?no:154的氨基酸序列的cdr-l3；(c)所述vh域包含：包含seq?id?no:155的氨基酸序列的cdr-h1、包含seq?idno:156的氨基酸序列的cdr-h2和包含seq?id?no:157的氨基酸序列的cdr-h3；并且其中所述vl域包含：包含seq?id?no:158的氨基酸序列的cdr-l1、包含seq?id?no:159的氨基酸序列的cdr-l2和包含seq?id?no:160的氨基酸序列的cdr-l3；(d)所述vh域包含：包含seq?idno:161的氨基酸序列的cdr-h1、包含seq?id?no:162的氨基酸序列的cdr-h2和包含seq?idno:163的氨基酸序列的cdr-h3；并且其中所述vl域包含：包含seq?id?no:164的氨基酸序列的cdr-l1、包含seq?id?no:165的氨基酸序列的cdr-l2和包含seq?id?no:166的氨基酸序列的cdr-l3；(e)所述vh域包含：包含seq?id?no:167的氨基酸序列的cdr-h1、包含seq?id?no:168的氨基酸序列的cdr-h2和包含seq?id?no:169的氨基酸序列的cdr-h3；并且其中所述vl域包含：包含seq?id?no:170的氨基酸序列的cdr-l1、包含seq?id?no:171的氨基酸序列的cdr-l2和包含seq?id?no:172的氨基酸序列的cdr-l3；(f)所述vh域包含：包含seq?id?no:173的氨基酸序列的cdr-h1、包含seq?id?no:174的氨基酸序列的cdr-h2和包含seq?id?no:175的氨基酸序列的cdr-h3；并且其中所述vl域包含：包含seq?id?no:176的氨基酸序列的cdr-l1、包含seq?id?no:177的氨基酸序列的cdr-l2和包含seq?id?no:178的氨基酸序列的cdr-l3；(g)所述vh域包含：包含seq?id?no:179的氨基酸序列的cdr-h1、包含seq?id?no:180的氨基酸序列的cdr-h2和包含seq?id?no:181的氨基酸序列的cdr-h3；并且其中所述vl域包含：包含seq?id?no:182的氨基酸序列的cdr-l1、包含seq?id?no:183的氨基酸序列的cdr-l2和包含seq?id?no:184的氨基酸序列的cdr-l3；(h)所述vh域包含：包含seq?id?no:143的氨基酸序列的cdr-h1、包含seq?id?no:144的氨基酸序列的cdr-h2和包含seq?id?no:145的氨基酸序列的cdr-h3；并且其中所述vl域包含：包含seq?id?no:146的氨基酸序列的cdr-l1、包含seq?id?no:147的氨基酸序列的cdr-l2和包含seq?id?no:148的氨基酸序列的cdr-l3；(i)所述vh域包含：包含x1x2ais(seq?id?no:185)的氨基酸序列的cdr-h1，其中x1为s、k、g、n、r、d、t或g，并且其中x2为y、l、h或f；包含x1x2x3px4x5x6x7x8x9yx10qkfx11g(seq?id?no:186)的氨基酸序列的cdr-h2，其中x1为g或h，x2为i或f，x3为i、n或m，x4为g、n、h、s、r、i或a，x5为a、n、h、s、t、f或y，x6为a、d或g，x7为t、e、k、v、q或a，x8为a或t，x9为n或k，x10为a或n，并且x11为q或t；和包含x1x2x3gx4x5lfx6x7(seq?id?no:187)的氨基酸序列的cdr-h3，其中x1为d或a，x2为a、g、e、r、y、k、n、q、l或f，x3为a、l、p或y，x4为i或l，x5为r、a、q或s，x6为a或d，并且x7为d、e、a或s；并且其中所述vl域包含：包含x1x2sx3x4ix5gx6ln(seqid?no:188)的氨基酸序列的cdr-l1，其中x1为r或g，x2为a或t，x3为q或e，x4为e、n、t、s、a、k、d、g、r或q，x5为y或s，并且x6为a或v；包含gx1x2x3lx4x5(seq?id?no:189)的氨基酸序列的cdr-l2，其中x1为a或s，x2为t、s、e、q或d，x3为n、r、a、e或h，x4为q或a，并且x5为s或d；和包含qx1x2x3x4x5pwt(seq?id?no:190)的氨基酸序列的cdr-l3，其中x1为s、n、d、q、a或e，x2为t、i或s，x3为y、l或f，x4为d、g、t、e、q、a或y，并且x5为a、t、r、s、k或y；(j)所述vh域包含：包含seq?id?no:199的氨基酸序列的cdr-h1、包含seq?id?no:200的氨基酸序列的cdr-h2和包含seq?id?no:201的氨基酸序列的cdr-h3；并且其中所述vl域包含：包含seq?id?no:152的氨基酸序列的cdr-l1、包含seq?id?no:153的氨基酸序列的cdr-l2和包含seq?id?no:202的氨基酸序列的cdr-l3；(k)所述vh域包含：包含seq?id?no:199的氨基酸序列的cdr-h1、包含seq?id?no:203的氨基酸序列的cdr-h2和包含seq?id?no:204的氨基酸序列的cdr-h3；并且其中所述vl域包含：包含seq?id?no:205的氨基酸序列的cdr-l1、包含seq?id?no:206的氨基酸序列的cdr-l2和包含seq?id?no:207的氨基酸序列的cdr-l3；(l)所述vh域包含：包含seq?id?no:199的氨基酸序列的cdr-h1、包含seq?id?no:203的氨基酸序列的cdr-h2和包含seq?id?no:204的氨基酸序列的cdr-h3；并且其中所述vl域包含：包含seq?id?no:152的氨基酸序列的cdr-l1、包含seq?id?no:153的氨基酸序列的cdr-l2和包含seq?id?no:202的氨基酸序列的cdr-l3；(m)所述vh域包含：包含x1yx2ms(seq?id?no:208)的氨基酸序列的cdr-h1，其中x1为s、d、e、a或q并且x2为a、g或t；包含dix1x2x3gx4x5tx6yadsvkg(seq?idno:209)的氨基酸序列的cdr-h2，其中x1为t、n、s、q、e、h、r或a，x2为y、w、f或h，x3为a、s、q、e或t，x4为g或e，x5为s或i，并且x6为a或g；和包含x1x2x3yx4wx5x6ax7dx8(seq?id?no:210)的氨基酸序列的cdr-h3，其中x1为s或a，x2为n、h、a、d、l、q、y或r，x3为a、n、s或g，x4为a、v、r、e或s，x5为d或s，x6为d、n、q、e、s、t或l，x7为l、f或m，并且x8为i、y或v；并且其中所述vl域包含：包含rasqsvssnla(seq?id?no:176)的氨基酸序列的cdr-l1；包含gassrat(seq?idno:177)的氨基酸序列的cdr-l2；和包含qqygssppvt(seq?id?no:178)的氨基酸序列的cdr-l3；(n)所述vh域包含：包含seq?id?no:220的氨基酸序列的cdr-h1；包含seq?id?no:221的氨基酸序列的cdr-h2；和包含seq?id?no:222的氨基酸序列的cdr-h3；并且其中所述vl域包含：包含rasqsvssnla(seq?id?no:176)的氨基酸序列的cdr-l1；包含gassrat(seq?id?no:177)的氨基酸序列的cdr-l2；和包含qqygssppvt(seq?id?no:178)的氨基酸序列的cdr-l3；(o)所述vh域包含：包含seq?id?no:220的氨基酸序列的cdr-h1；包含seq?id?no:260的氨基酸序列的cdr-h2；和包含seq?id?no:222的氨基酸序列的cdr-h3；并且其中所述vl域包含：包含rasqsvssnla(seq?id?no:176)的氨基酸序列的cdr-l1；包含gassrat(seq?id?no:177)的氨基酸序列的cdr-l2；和包含qqygssppvt(seq?id?no:178)的氨基酸序列的cdr-l3；或(p)所述vh域包含：包含seq?id?no:252的氨基酸序列的cdr-h1、包含seq?id?no:253的氨基酸序列的cdr-h2和包含seq?id?no:254的氨基酸序列的cdr-h3；并且其中所述vl域包含：包含seq?id?no:255的氨基酸序列的cdr-l1、包含seq?id?no:256的氨基酸序列的cdr-l2和包含seq?id?no:257的氨基酸序列的cdr-l3。

91、在一些实施方案中，所述抗体或抗原结合片段包含重链可变(vh)域和轻链可变(vl)域；并且其中：(a)所述vh域包含：包含seq?id?no:226的氨基酸序列的cdr-h1、包含seqid?no:227的氨基酸序列的cdr-h2和包含seq?id?no:151的氨基酸序列的cdr-h3；并且其中所述vl域包含：包含seq?id?no:152的氨基酸序列的cdr-l1、包含seq?id?no:153的氨基酸序列的cdr-l2和包含seq?id?no:154的氨基酸序列的cdr-l3；(b)所述vh域包含：包含seqid?no:228的氨基酸序列的cdr-h1、包含seq?id?no:227的氨基酸序列的cdr-h2和包含seqid?no:157的氨基酸序列的cdr-h3；并且其中所述vl域包含：包含seq?id?no:158的氨基酸序列的cdr-l1、包含seq?id?no:159的氨基酸序列的cdr-l2和包含seq?id?no:160的氨基酸序列的cdr-l3；(c)所述vh域包含：包含seq?id?no:223的氨基酸序列的cdr-h1、包含seq?idno:227的氨基酸序列的cdr-h2和包含seq?id?no:163的氨基酸序列的cdr-h3；并且其中所述vl域包含：包含seq?id?no:164的氨基酸序列的cdr-l1、包含seq?id?no:165的氨基酸序列的cdr-l2和包含seq?id?no:166的氨基酸序列的cdr-l3；(d)所述vh域包含：包含seq?idno:229的氨基酸序列的cdr-h1、包含seq?id?no:227的氨基酸序列的cdr-h2和包含seq?idno:169的氨基酸序列的cdr-h3；并且其中所述vl域包含：包含seq?id?no:170的氨基酸序列的cdr-l1、包含seq?id?no:171的氨基酸序列的cdr-l2和包含seq?id?no:172的氨基酸序列的cdr-l3；(e)所述vh域包含：包含seq?id?no:230的氨基酸序列的cdr-h1、包含seq?id?no:231的氨基酸序列的cdr-h2和包含seq?id?no:175的氨基酸序列的cdr-h3；并且其中所述vl域包含：包含seq?id?no:176的氨基酸序列的cdr-l1、包含seq?id?no:177的氨基酸序列的cdr-l2和包含seq?id?no:178的氨基酸序列的cdr-l3；(f)所述vh域包含：包含seq?id?no:230的氨基酸序列的cdr-h1、包含seq?id?no:232的氨基酸序列的cdr-h2和包含seq?id?no:181的氨基酸序列的cdr-h3；并且其中所述vl域包含：包含seq?id?no:182的氨基酸序列的cdr-l1、包含seq?id?no:183的氨基酸序列的cdr-l2和包含seq?id?no:184的氨基酸序列的cdr-l3；(g)所述vh域包含：包含seq?id?no:223的氨基酸序列的cdr-h1、包含seq?id?no:224的氨基酸序列的cdr-h2和包含seq?id?no:225的氨基酸序列的cdr-h3；并且其中所述vl域包含：包含seq?id?no:140的氨基酸序列的cdr-l1、包含seq?id?no:141的氨基酸序列的cdr-l2和包含seq?id?no:142的氨基酸序列的cdr-l3；(h)所述vh域包含：包含seq?id?no:233的氨基酸序列的cdr-h1、包含seq?id?no:234的氨基酸序列的cdr-h2和包含seq?id?no:145的氨基酸序列的cdr-h3；并且其中所述vl域包含：包含seq?id?no:146的氨基酸序列的cdr-l1、包含seq?id?no:147的氨基酸序列的cdr-l2和包含seq?id?no:148的氨基酸序列的cdr-l3；(i)所述vh域包含：包含gx1x2fx3x4x5(seq?id?no:235)的氨基酸序列的cdr-h1，其中x1为g、y、s或a，x2为t、s、g、r、n或h，x3为s、t、r、h、y、g或p，x4为s、k、g、n、r、d、t或g，并且x5为y、l、h或f；包含x1px2x3x4x5(seq?id?no:236)的氨基酸序列的cdr-h2，其中x1为i、n或m，x2为g、n、h、s、r、i或a，x3为a、n、h、s、t、f或y，x4为a、d或g，并且x5为t、e、k、v、q或a；和包含x1x2x3gx4x5lfx6x7(seq?id?no:237)的氨基酸序列的cdr-h3，其中x1为d或a，x2为a、g、e、r、y、k、n、q、l或f，x3为a、l、p或y，x4为i或l，x5为r、a、q或s，x6为a或d，并且x7为d、e、a或s；并且其中所述vl域包含：包含x1x2sx3x4ix5gx6ln(seq?id?no:188)的氨基酸序列的cdr-l1，其中x1为r或g，x2为a或t，x3为q或e，x4为e、n、t、s、a、k、d、g、r或q，x5为y或s，并且x6为a或v；包含gx1x2x3lx4x5(seq?id?no:189)的氨基酸序列的cdr-l2，其中x1为a或s，x2为t、s、e、q或d，x3为n、r、a、e或h，x4为q或a，并且x5为s或d；和包含qx1x2x3x4x5pwt(seq?id?no:190)的氨基酸序列的cdr-l3，其中x1为s、n、d、q、a或e，x2为t、i或s，x3为y、l或f，x4为d、g、t、e、q、a或y，并且x5为a、t、r、s、k或y；(j)所述vh域包含：包含seq?id?no:241的氨基酸序列的cdr-h1、包含seq?id?no:242的氨基酸序列的cdr-h2和包含seq?id?no:204的氨基酸序列的cdr-h3；并且其中所述vl域包含：包含seq?id?no:152的氨基酸序列的cdr-l1、包含seqid?no:153的氨基酸序列的cdr-l2和包含seq?id?no:202的氨基酸序列的cdr-l3；(k)所述vh域包含：包含seq?id?no:241的氨基酸序列的cdr-h1、包含seq?id?no:243的氨基酸序列的cdr-h2和包含seq?id?no:204的氨基酸序列的cdr-h3；并且其中所述vl域包含：包含seqid?no:205的氨基酸序列的cdr-l1、包含seq?id?no:206的氨基酸序列的cdr-l2和包含seqid?no:207的氨基酸序列的cdr-l3；(l)所述vh域包含：包含seq?id?no:241的氨基酸序列的cdr-h1、包含seq?id?no:243的氨基酸序列的cdr-h2和包含seq?id?no:204的氨基酸序列的cdr-h3；并且其中所述vl域包含：包含seq?id?no:152的氨基酸序列的cdr-l1、包含seq?idno:153的氨基酸序列的cdr-l2和包含seq?id?no:202的氨基酸序列的cdr-l3；(m)所述vh域包含：包含gftfx1x2y(seq?id?no:244)的氨基酸序列的cdr-h1，其中x1为s、d、e、q、s或a并且x2为s、d、e、a或q；包含x1x2x3gx4x5(seq?id?no:245)的氨基酸序列的cdr-h2，其中x1为t、n、s、q、e、h、r或a，x2为y、w、f或h，x3为a、s、q、e或t，x4为g或e，并且x5为s或i；和包含x1x2x3yx4wx5x6ax7dx8(seq?id?no:246)的氨基酸序列的cdr-h3，其中x1为s或a，x2为n、h、a、d、l、q、y或r，x3为a、n、s或g，x4为a、v、r、e或s，x5为d或s，x6为d、n、q、e、s、t或l，x7为l、f或m，并且x8为i、y或v；并且其中所述vl域包含：包含rasqsvssnla(seq?id?no:176)的氨基酸序列的cdr-l1、包含gassrat(seq?id?no:177)的氨基酸序列的cdr-l2和包含qqygssppvt(seq?id?no:178)的氨基酸序列的cdr-l3；(n)所述vh域包含：包含seq?id?no:250的氨基酸序列的cdr-h1；包含seq?id?no:251的氨基酸序列的cdr-h2；和包含seq?id?no:288的氨基酸序列的cdr-h3；并且其中所述vl域包含：包含rasqsvssnla(seq?id?no:176)的氨基酸序列的cdr-l1；包含gassrat(seq?id?no:177)的氨基酸序列的cdr-l2；和包含qqygssppvt(seq?id?no:178)的氨基酸序列的cdr-l3；(o)所述vh域包含：包含seq?id?no:250的氨基酸序列的cdr-h1；包含seq?id?no:261的氨基酸序列的cdr-h2；和包含seq?id?no:288的氨基酸序列的cdr-h3；并且其中所述vl域包含：包含rasqsvssnla(seq?id?no:176)的氨基酸序列的cdr-l1；包含gassrat(seq?id?no:177)的氨基酸序列的cdr-l2；和包含qqygssppvt(seq?id?no:178)的氨基酸序列的cdr-l3；或(p)所述vh域包含：包含seq?id?no:223的氨基酸序列的cdr-h1、包含seq?id?no:224的氨基酸序列的cdr-h2和包含seq?id?no:284的氨基酸序列的cdr-h3；并且其中所述vl域包含：包含seq?id?no:285的氨基酸序列的cdr-l1、包含seq?id?no:286的氨基酸序列的cdr-l2和包含seq?id?no:287的氨基酸序列的cdr-l3。

92、在一些实施方案中，(a)所述vh域包含与seq?id?no:109的序列至少90％、至少95％、至少99％或100％同一的氨基酸序列，并且其中所述vl域包含与seq?id?no:110的序列至少90％、至少95％、至少99％或100％同一的氨基酸序列；(b)所述vh域包含与seq?idno:111的序列至少90％、至少95％、至少99％或100％同一的氨基酸序列，并且其中所述vl域包含与seq?id?no:112的序列至少90％、至少95％、至少99％或100％同一的氨基酸序列；(c)所述vh域包含与seq?id?no:113的序列至少90％、至少95％、至少99％或100％同一的氨基酸序列，并且其中所述vl域包含与seq?id?no:114的序列至少90％、至少95％、至少99％或100％同一的氨基酸序列；(d)所述vh域包含与seq?id?no:115的序列至少90％、至少95％、至少99％或100％同一的氨基酸序列，并且其中所述vl域包含与seq?id?no:116的序列至少90％、至少95％、至少99％或100％同一的氨基酸序列；(e)所述vh域包含与seq?idno:117的序列至少90％、至少95％、至少99％或100％同一的氨基酸序列，并且其中所述vl域包含与seq?id?no:118的序列至少90％、至少95％、至少99％或100％同一的氨基酸序列；(f)所述vh域包含与seq?id?no:119的序列至少90％、至少95％、至少99％或100％同一的氨基酸序列，并且其中所述vl域包含与seq?id?no:120的序列至少90％、至少95％、至少99％或100％同一的氨基酸序列；(g)所述vh域包含与seq?id?no:123的序列至少90％、至少95％、至少99％或100％同一的氨基酸序列；并且其中所述vl域包含与seq?id?no:124的序列至少90％、至少95％、至少99％或100％同一的氨基酸序列；(h)所述vh域包含与seq?idno:129的序列至少90％、至少95％、至少99％或100％同一的氨基酸序列，并且其中所述vl域包含与seq?id?no:130的序列至少90％、至少95％、至少99％或100％同一的氨基酸序列；(i)所述vh域包含与seq?id?no:131的序列至少90％、至少95％、至少99％或100％同一的氨基酸序列；并且其中所述vl域包含与seq?id?no:132的序列至少90％、至少95％、至少99％或100％同一的氨基酸序列；(j)所述vh域包含与seq?id?no:125的序列至少90％、至少95％、至少99％或100％同一的氨基酸序列；并且其中所述vl域包含与seq?id?no:126的序列至少90％、至少95％、至少99％或100％同一的氨基酸序列；(k)所述vh域包含与seq?idno:127的序列至少90％、至少95％、至少99％或100％同一的氨基酸序列，并且其中所述vl域包含与seq?id?no:128的序列至少90％、至少95％、至少99％或100％同一的氨基酸序列；(l)所述vh域包含与seq?id?no:133的序列至少90％、至少95％、至少99％或100％同一的氨基酸序列；并且其中所述vl域包含与seq?id?no:134的序列至少90％、至少95％、至少99％或100％同一的氨基酸序列；(m)所述vh域包含与seq?id?no:135的序列至少90％、至少95％、至少99％或100％同一的氨基酸序列；并且其中所述vl域包含与seq?id?no:136的序列至少90％、至少95％、至少99％或100％同一的氨基酸序列；(n)所述vh域包含与seq?idno:107的序列至少90％、至少95％、至少99％或100％同一的氨基酸序列；并且其中所述vl域包含与seq?id?no:108的序列至少90％、至少95％、至少99％或100％同一的氨基酸序列；(o)所述vh域包含与seq?id?no:121的序列至少90％、至少95％、至少99％或100％同一的氨基酸序列；并且其中所述vl域包含与seq?id?no:122的序列至少90％、至少95％、至少99％或100％同一的氨基酸序列；或(p)所述vh域包含与seq?id?no:258的序列至少90％、至少95％、至少99％或100％同一的氨基酸序列，并且其中所述vl域包含与seq?id?no:259的序列至少90％、至少95％、至少99％或100％同一的氨基酸序列。

93、在一些实施方案中，(a)所述vh域包含：包含seq?id?no:199的氨基酸序列的cdr-h1、包含seq?id?no:203的氨基酸序列的cdr-h2和包含seq?id?no:204的氨基酸序列的cdr-h3；并且其中所述vl域包含：包含seq?id?no:205的氨基酸序列的cdr-l1、包含seq?id?no:206的氨基酸序列的cdr-l2和包含seq?id?no:207的氨基酸序列的cdr-l3；

94、(b)所述vh域包含：包含seq?id?no:241的氨基酸序列的cdr-h1、包含seq?id?no:243的氨基酸序列的cdr-h2和包含seq?id?no:204的氨基酸序列的cdr-h3；并且其中所述vl域包含：包含seq?id?no:205的氨基酸序列的cdr-l1、包含seq?id?no:206的氨基酸序列的cdr-l2和包含seq?id?no:207的氨基酸序列的cdr-l3；

95、(c)所述vh域包含：包含seq?id?no:220的氨基酸序列的cdr-h1、包含seq?id?no:221的氨基酸序列的cdr-h2和包含seq?id?no:222的氨基酸序列的cdr-h3；并且其中所述vl域包含：包含seq?id?no:176的氨基酸序列的cdr-l1、包含seq?id?no:177的氨基酸序列的cdr-l2和包含seq?id?no:178的氨基酸序列的cdr-l3；或

96、(d)所述vh域包含：包含seq?id?no:250的氨基酸序列的cdr-h1、包含seq?id?no:251的氨基酸序列的cdr-h2和包含seq?id?no:288的氨基酸序列的cdr-h3；并且其中所述vl域包含：包含seq?id?no:176的氨基酸序列的cdr-l1、包含seq?id?no:177的氨基酸序列的cdr-l2和包含seq?id?no:178的氨基酸序列的cdr-l3。

97、在一些实施方案中，(a)所述vh域包含与seq?id?no:129的序列至少90％、至少95％、至少99％或100％同一的氨基酸序列，并且其中所述vl域包含与seq?id?no:130的序列至少90％、至少95％、至少99％或100％同一的氨基酸序列；或(b)所述vh域包含与seq?idno:127的序列至少90％、至少95％、至少99％或100％同一的氨基酸序列，并且其中所述vl域包含与seq?id?no:128的序列至少90％、至少95％、至少99％或100％同一的氨基酸序列。

98、在一些实施方案中，本公开提供了一种融合蛋白，所述融合蛋白包含：

99、a)包含以下的il-21多肽：(i)提供相对于包含seq?id?no:1的人类il-21多肽降低的等电点的四个或更多个氨基酸取代，其中所述四个或更多个氨基酸取代是在seq?id?no:1的s80至t92内，其中至少四个氨基酸取代是在残基r85、r86、k88、h89、r90或其组合处；和(ii)提供相对于所述人类il-21多肽的结合减少的与人类il-21受体的结合的至少一个氨基酸取代；和

100、b)特异性结合至cd8αβ或cd8β的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段包含：

101、(i)vh域，其包含：包含seq?id?no:199的氨基酸序列的cdr-h1、包含seq?id?no:203的氨基酸序列的cdr-h2和包含seq?id?no:204的氨基酸序列的cdr-h3；和vl域，其包含：包含seq?id?no:205的氨基酸序列的cdr-l1、包含seq?id?no:206的氨基酸序列的cdr-l2和包含seq?id?no:207的氨基酸序列的cdr-l3；

102、(ii)vh域，其包含：包含seq?id?no:241的氨基酸序列的cdr-h1、包含seq?id?no:243的氨基酸序列的cdr-h2和包含seq?id?no:204的氨基酸序列的cdr-h3；和vl域，其包含：包含seq?id?no:205的氨基酸序列的cdr-l1、包含seq?id?no:206的氨基酸序列的cdr-l2和包含seq?id?no:207的氨基酸序列的cdr-l3；

103、(iii)vh域，其包含：包含seq?id?no:220的氨基酸序列的cdr-h1、包含seq?id?no:221的氨基酸序列的cdr-h2和包含seq?id?no:222的氨基酸序列的cdr-h3；和vl域，其包含：包含seq?id?no:176的氨基酸序列的cdr-l1、包含seq?id?no:177的氨基酸序列的cdr-l2和包含seq?id?no:178的氨基酸序列的cdr-l3；或

104、(iv)vh域，其包含：包含seq?id?no:250的氨基酸序列的cdr-h1、包含seq?id?no:251的氨基酸序列的cdr-h2和包含seq?id?no:288的氨基酸序列的cdr-h3；和vl域，其包含：包含seq?id?no:176的氨基酸序列的cdr-l1、包含seq?id?no:177的氨基酸序列的cdr-l2和包含seq?id?no:178的氨基酸序列的cdr-l3。

105、在一些实施方案中，本公开提供了一种融合蛋白，所述融合蛋白包含：

106、a)包含以下的il-21多肽：(i)提供相对于包含seq?id?no:1的人类il-21多肽降低的等电点的四个或更多个氨基酸取代，其中所述四个或更多个氨基酸取代是在seq?id?no:1的s80至t92内，其中至少四个氨基酸取代是在残基r85、r86、k88、h89、r90或其组合处；和(ii)提供相对于所述人类il-21多肽的结合减少的与人类il-21受体的结合的至少一个氨基酸取代，其中所述至少一个氨基酸取代是在选自r5、i8、r9、r11、l13、i14、i16、v17、d18、k72、k73、l74、k75、r76、k77、k117和其组合的残基处；和

107、b)特异性结合至cd8αβ或cd8β的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段包含：

108、(i)vh域，其包含：包含seq?id?no:199的氨基酸序列的cdr-h1、包含seq?id?no:203的氨基酸序列的cdr-h2和包含seq?id?no:204的氨基酸序列的cdr-h3；和vl域，其包含：包含seq?id?no:205的氨基酸序列的cdr-l1、包含seq?id?no:206的氨基酸序列的cdr-l2和包含seq?id?no:207的氨基酸序列的cdr-l3；

109、(ii)vh域，其包含：包含seq?id?no:241的氨基酸序列的cdr-h1、包含seq?id?no:243的氨基酸序列的cdr-h2和包含seq?id?no:204的氨基酸序列的cdr-h3；和vl域，其包含：包含seq?id?no:205的氨基酸序列的cdr-l1、包含seq?id?no:206的氨基酸序列的cdr-l2和包含seq?id?no:207的氨基酸序列的cdr-l3；

110、(iii)vh域，其包含：包含seq?id?no:220的氨基酸序列的cdr-h1、包含seq?id?no:221的氨基酸序列的cdr-h2和包含seq?id?no:222的氨基酸序列的cdr-h3；和vl域，其包含：包含seq?id?no:176的氨基酸序列的cdr-l1、包含seq?id?no:177的氨基酸序列的cdr-l2和包含seq?id?no:178的氨基酸序列的cdr-l3；或

111、(iv)vh域，其包含：包含seq?id?no:250的氨基酸序列的cdr-h1、包含seq?id?no:251的氨基酸序列的cdr-h2和包含seq?id?no:288的氨基酸序列的cdr-h3；和vl域，其包含：包含seq?id?no:176的氨基酸序列的cdr-l1、包含seq?id?no:177的氨基酸序列的cdr-l2和包含seq?id?no:178的氨基酸序列的cdr-l3。

112、在一些实施方案中，本公开提供了一种融合蛋白，所述融合蛋白包含：

113、a)包含以下的il-21多肽：(i)提供相对于包含seq?id?no:1的人类il-21多肽降低的等电点的四个或更多个氨基酸取代，其中所述四个或更多个氨基酸取代是在seq?id?no:1的s80至t92内，其中至少四个氨基酸取代是在残基r85、r86、k88、h89、r90或其组合处；和(ii)选自以下的至少一个氨基酸取代：(a)r11d；(b)r11e；(c)i14d、d18a和k117a；(d)r76e；(e)r5f；(f)r76f；(g)i8e；(h)r5a；(i)r5e；(j)r5s；(k)r5t；(l)r5n；(m)r5q；(n)r5v；(o)r5i；(p)r5l；(q)r5y；(r)r76a；(s)r76n；(t)r76d；(u)r76s；(v)r76t；(w)r76q；(x)r76v；(y)r76i；(z)r76l；(aa)r76y；(bb)k77a；(cc)k77e；(dd)k72a；(ee)k72e；(ff)k75a；(gg)k75e；(hh)k73a；(ii)k73e；(jj)r5f和k77a；(kk)r5f和k77e；(ll)r5f和k72a；(mm)r5f和k72e；(nn)r5f和k76a；(oo)r5f和k76e；(pp)k73a和k76f；(qq)k73e和k76f；(rr)r9a；(ss)r9d；(tt)r9e；(uu)r9h；(vv)r9s；(ww)r9t；(xx)r9n；(zz)r9g；(aaa)r9v；(bbb)r9i；(ccc)r9l；(ddd)r9y；(eee)k72a和r76f；(fff)k75a和r76f；(ggg)r76f和k77a；(hhh)k75e和r76f；(iii)v17i和l74i；(jjj)i16a和l74f；(kkk)i16s、v17i和l74v；(lll)i16r、v17i和l74i；(mmm)l13f、i16a、v17a和l74m；和(nnn)l13r、i16a、v17i和l74i；和

114、b)特异性结合至cd8αβ或cd8β的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段包含：

115、(i)vh域，其包含：包含seq?id?no:199的氨基酸序列的cdr-h1、包含seq?id?no:203的氨基酸序列的cdr-h2和包含seq?id?no:204的氨基酸序列的cdr-h3；和vl域，其包含：包含seq?id?no:205的氨基酸序列的cdr-l1、包含seq?id?no:206的氨基酸序列的cdr-l2和包含seq?id?no:207的氨基酸序列的cdr-l3；

116、(ii)vh域，其包含：包含seq?id?no:241的氨基酸序列的cdr-h1、包含seq?id?no:243的氨基酸序列的cdr-h2和包含seq?id?no:204的氨基酸序列的cdr-h3；和vl域，其包含：包含seq?id?no:205的氨基酸序列的cdr-l1、包含seq?id?no:206的氨基酸序列的cdr-l2和包含seq?id?no:207的氨基酸序列的cdr-l3；

117、(iii)vh域，其包含：包含seq?id?no:220的氨基酸序列的cdr-h1、包含seq?id?no:221的氨基酸序列的cdr-h2和包含seq?id?no:222的氨基酸序列的cdr-h3；和vl域，其包含：包含seq?id?no:176的氨基酸序列的cdr-l1、包含seq?id?no:177的氨基酸序列的cdr-l2和包含seq?id?no:178的氨基酸序列的cdr-l3；或

118、(iv)vh域，其包含：包含seq?id?no:250的氨基酸序列的cdr-h1、包含seq?id?no:251的氨基酸序列的cdr-h2和包含seq?id?no:288的氨基酸序列的cdr-h3；和vl域，其包含：包含seq?id?no:176的氨基酸序列的cdr-l1、包含seq?id?no:177的氨基酸序列的cdr-l2和包含seq?id?no:178的氨基酸序列的cdr-l3。

119、在一些实施方案中，本公开提供了一种融合蛋白，所述融合蛋白包含：

120、a)包含以下的il-21多肽：(i)提供相对于包含seq?id?no:1的人类il-21多肽降低的等电点的四个或更多个氨基酸取代，其中所述四个或更多个氨基酸取代是在残基s80、t81、n82、a83、r85、r86、q87、k88、h89、r90、l91、t92或其组合处；和(ii)提供相对于所述人类il-21多肽的结合减少的与人类il-21受体的结合的至少一个氨基酸取代，其中所述至少一个氨基酸取代是在选自r5、i8、r9、r11、l13、i14、i16、v17、d18、k72、k73、l74、k75、r76、k77、k117和其组合的残基处；和

121、b)特异性结合至cd8αβ或cd8β的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段包含：

122、(i)vh域，其包含：包含seq?id?no:199的氨基酸序列的cdr-h1、包含seq?id?no:203的氨基酸序列的cdr-h2和包含seq?id?no:204的氨基酸序列的cdr-h3；和vl域，其包含：包含seq?id?no:205的氨基酸序列的cdr-l1、包含seq?id?no:206的氨基酸序列的cdr-l2和包含seq?id?no:207的氨基酸序列的cdr-l3；

123、(ii)vh域，其包含：包含seq?id?no:241的氨基酸序列的cdr-h1、包含seq?id?no:243的氨基酸序列的cdr-h2和包含seq?id?no:204的氨基酸序列的cdr-h3；和vl域，其包含：包含seq?id?no:205的氨基酸序列的cdr-l1、包含seq?id?no:206的氨基酸序列的cdr-l2和包含seq?id?no:207的氨基酸序列的cdr-l3；

124、(iii)vh域，其包含：包含seq?id?no:220的氨基酸序列的cdr-h1、包含seq?id?no:221的氨基酸序列的cdr-h2和包含seq?id?no:222的氨基酸序列的cdr-h3；和vl域，其包含：包含seq?id?no:176的氨基酸序列的cdr-l1、包含seq?id?no:177的氨基酸序列的cdr-l2和包含seq?id?no:178的氨基酸序列的cdr-l3；或

125、(iv)vh域，其包含：包含seq?id?no:250的氨基酸序列的cdr-h1、包含seq?id?no:251的氨基酸序列的cdr-h2和包含seq?id?no:288的氨基酸序列的cdr-h3；和vl域，其包含：包含seq?id?no:176的氨基酸序列的cdr-l1、包含seq?id?no:177的氨基酸序列的cdr-l2和包含seq?id?no:178的氨基酸序列的cdr-l3。

126、在一些实施方案中，本公开提供了一种融合蛋白，所述融合蛋白包含：

127、a)包含以下的il-21多肽：(i)提供相对于包含seq?id?no:1的人类il-21多肽降低的等电点的四个或更多个氨基酸取代，其中所述四个或更多个氨基酸取代是在残基s80、t81、n82、a83、r85、r86、q87、k88、h89、r90、l91、t92或其组合处；和(ii)提供相对于所述人类il-21多肽的结合减少的与人类il-21受体的结合的至少一个氨基酸取代，其中所述至少一个氨基酸取代是在残基r76处；和

128、b)特异性结合至cd8αβ或cd8β的抗体或其抗原结合片段。

129、在一些实施方案中，本公开提供了一种融合蛋白，所述融合蛋白包含：

130、a)包含以下的il-21多肽：(i)选自seq?id?no:2、4-15和23-40的氨基酸序列，和(ii)提供相对于人类il-21多肽的结合减少的与人类il-21受体的结合的至少一个氨基酸取代；和

131、b)特异性结合至cd8αβ或cd8β的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段包含：

132、(i)vh域，其包含：包含seq?id?no:199的氨基酸序列的cdr-h1、包含seq?id?no:203的氨基酸序列的cdr-h2和包含seq?id?no:204的氨基酸序列的cdr-h3；和vl域，其包含：包含seq?id?no:205的氨基酸序列的cdr-l1、包含seq?id?no:206的氨基酸序列的cdr-l2和包含seq?id?no:207的氨基酸序列的cdr-l3；

133、(ii)vh域，其包含：包含seq?id?no:241的氨基酸序列的cdr-h1、包含seq?id?no:243的氨基酸序列的cdr-h2和包含seq?id?no:204的氨基酸序列的cdr-h3；和vl域，其包含：包含seq?id?no:205的氨基酸序列的cdr-l1、包含seq?id?no:206的氨基酸序列的cdr-l2和包含seq?id?no:207的氨基酸序列的cdr-l3；

134、(iii)vh域，其包含：包含seq?id?no:220的氨基酸序列的cdr-h1、包含seq?id?no:221的氨基酸序列的cdr-h2和包含seq?id?no:222的氨基酸序列的cdr-h3；和vl域，其包含：包含seq?id?no:176的氨基酸序列的cdr-l1、包含seq?id?no:177的氨基酸序列的cdr-l2和包含seq?id?no:178的氨基酸序列的cdr-l3；或

135、(iv)vh域，其包含：包含seq?id?no:250的氨基酸序列的cdr-h1、包含seq?id?no:251的氨基酸序列的cdr-h2和包含seq?id?no:288的氨基酸序列的cdr-h3；和vl域，其包含：包含seq?id?no:176的氨基酸序列的cdr-l1、包含seq?id?no:177的氨基酸序列的cdr-l2和包含seq?id?no:178的氨基酸序列的cdr-l3。

136、在一些实施方案中，本公开提供了一种融合蛋白，所述融合蛋白包含：

137、a)包含以下的il-21多肽：(i)选自seq?id?no:2、4-15和23-40的氨基酸序列，和(ii)提供相对于人类il-21多肽的结合减少的与人类il-21受体的结合的至少一个氨基酸取代，其中所述至少一个氨基酸取代是在选自r5、i8、r9、r11、l13、i14、i16、v17、d18、k72、k73、l74、k75、r76、k77、k117和其组合的残基处；和

138、b)特异性结合至cd8αβ或cd8β的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段包含：

139、(i)vh域，其包含：包含seq?id?no:199的氨基酸序列的cdr-h1、包含seq?id?no:203的氨基酸序列的cdr-h2和包含seq?id?no:204的氨基酸序列的cdr-h3；和vl域，其包含：包含seq?id?no:205的氨基酸序列的cdr-l1、包含seq?id?no:206的氨基酸序列的cdr-l2和包含seq?id?no:207的氨基酸序列的cdr-l3；

140、(ii)vh域，其包含：包含seq?id?no:241的氨基酸序列的cdr-h1、包含seq?id?no:243的氨基酸序列的cdr-h2和包含seq?id?no:204的氨基酸序列的cdr-h3；和vl域，其包含：包含seq?id?no:205的氨基酸序列的cdr-l1、包含seq?id?no:206的氨基酸序列的cdr-l2和包含seq?id?no:207的氨基酸序列的cdr-l3；

141、(iii)vh域，其包含：包含seq?id?no:220的氨基酸序列的cdr-h1、包含seq?id?no:221的氨基酸序列的cdr-h2和包含seq?id?no:222的氨基酸序列的cdr-h3；和vl域，其包含：包含seq?id?no:176的氨基酸序列的cdr-l1、包含seq?id?no:177的氨基酸序列的cdr-l2和包含seq?id?no:178的氨基酸序列的cdr-l3；或

142、(iv)vh域，其包含：包含seq?id?no:250的氨基酸序列的cdr-h1、包含seq?id?no:251的氨基酸序列的cdr-h2和包含seq?id?no:288的氨基酸序列的cdr-h3；和vl域，其包含：包含seq?id?no:176的氨基酸序列的cdr-l1、包含seq?id?no:177的氨基酸序列的cdr-l2和包含seq?id?no:178的氨基酸序列的cdr-l3。

143、在一些实施方案中，本公开提供了一种融合蛋白，所述融合蛋白包含：

144、a)包含以下的il-21多肽：(i)选自seq?id?no:2、4-15和23-40的氨基酸序列，和(ii)提供相对于人类il-21多肽的结合减少的与人类il-21受体的结合的至少一个氨基酸取代，其中所述至少一个氨基酸取代是在残基r76处；和

145、b)特异性结合至cd8αβ或cd8β的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段包含：

146、(i)vh域，其包含：包含seq?id?no:199的氨基酸序列的cdr-h1、包含seq?id?no:203的氨基酸序列的cdr-h2和包含seq?id?no:204的氨基酸序列的cdr-h3；和vl域，其包含：包含seq?id?no:205的氨基酸序列的cdr-l1、包含seq?id?no:206的氨基酸序列的cdr-l2和包含seq?id?no:207的氨基酸序列的cdr-l3；

147、(ii)vh域，其包含：包含seq?id?no:241的氨基酸序列的cdr-h1、包含seq?id?no:243的氨基酸序列的cdr-h2和包含seq?id?no:204的氨基酸序列的cdr-h3；和vl域，其包含：包含seq?id?no:205的氨基酸序列的cdr-l1、包含seq?id?no:206的氨基酸序列的cdr-l2和包含seq?id?no:207的氨基酸序列的cdr-l3；

148、(iii)vh域，其包含：包含seq?id?no:220的氨基酸序列的cdr-h1、包含seq?id?no:221的氨基酸序列的cdr-h2和包含seq?id?no:222的氨基酸序列的cdr-h3；和vl域，其包含：包含seq?id?no:176的氨基酸序列的cdr-l1、包含seq?id?no:177的氨基酸序列的cdr-l2和包含seq?id?no:178的氨基酸序列的cdr-l3；或

149、(iv)vh域，其包含：包含seq?id?no:250的氨基酸序列的cdr-h1、包含seq?id?no:251的氨基酸序列的cdr-h2和包含seq?id?no:288的氨基酸序列的cdr-h3；和vl域，其包含：包含seq?id?no:176的氨基酸序列的cdr-l1、包含seq?id?no:177的氨基酸序列的cdr-l2和包含seq?id?no:178的氨基酸序列的cdr-l3。

150、在一些实施方案中，本公开提供了一种融合蛋白，所述融合蛋白包含：

151、a)包含vl链和cl1链的第一多肽，其中所述vl链包含：包含seq?id?no:205的氨基酸序列的cdr-l1、包含seq?id?no:206的氨基酸序列的cdr-l2和包含seq?id?no:207的氨基酸序列的cdr-l3；

152、b)包含vh链和hc恒定域的第二多肽，其中il-21多肽可操作地连接至所述hc恒定域的c端，其中所述hc恒定域包含杵修饰，并且其中所述vh链包含：包含seq?id?no:199的氨基酸序列的cdr-h1、包含seq?id?no:203的氨基酸序列的cdr-h2和包含seq?id?no:204的氨基酸序列的cdr-h3；

153、c)包含vh链和hc恒定域的第三多肽，其中所述hc恒定域包含臼修饰，并且其中所述第二多肽和所述第三多肽的所述vh链是相同的；和

154、d)包含vl链和cl1链的第四多肽，其中所述第一多肽和所述第四多肽的所述vl链是相同的，并且

155、其中所述il-21多肽包含(i)提供相对于包含seq?id?no:1的人类il-21多肽降低的等电点的一个或多个氨基酸取代，其中所述一个或多个氨基酸取代是在seq?id?no:1的s80至t92内，其中至少一个氨基酸取代是在残基r85、r86、k88、h89、r90或其组合处；和(ii)提供相对于所述人类il-21多肽的结合减少的与人类il-21受体的结合的至少一个氨基酸取代。

156、在一些实施方案中，本公开提供了一种融合蛋白，所述融合蛋白包含：

157、a)包含vl链和cl1链的第一多肽，其中所述vl链包含：包含seq?id?no:205的氨基酸序列的cdr-l1、包含seq?id?no:206的氨基酸序列的cdr-l2和包含seq?id?no:207的氨基酸序列的cdr-l3；

158、b)包含vh链和hc恒定域的第二多肽，其中所述hc恒定域包含杵修饰，并且其中所述vh链包含：包含seq?id?no:199的氨基酸序列的cdr-h1、包含seq?id?no:203的氨基酸序列的cdr-h2和包含seq?id?no:204的氨基酸序列的cdr-h3；

159、c)包含vh链和hc恒定域的第三多肽，其中il-21多肽可操作地连接至所述hc恒定域的c端，其中所述hc恒定域包含臼修饰，并且其中所述第二多肽和所述第三多肽的所述vh链是相同的；和

160、d)包含vl链和cl1链的第四多肽，其中所述第一多肽和所述第四多肽的所述vl链是相同的，并且

161、其中所述il-21多肽包含(i)提供相对于包含seq?id?no:1的人类il-21多肽降低的等电点的一个或多个氨基酸取代，其中所述一个或多个氨基酸取代是在seq?id?no:1的s80至t92内，其中至少一个氨基酸取代是在残基r85、r86、k88、h89、r90或其组合处；和(ii)提供相对于所述人类il-21多肽的结合减少的与人类il-21受体的结合的至少一个氨基酸取代。

162、在一些实施方案中，本公开提供了一种融合蛋白，所述融合蛋白包含：

163、a)包含vl链和cl1链的第一多肽，其中所述vl链包含：包含seq?id?no:176的氨基酸序列的cdr-l1、包含seq?id?no:177的氨基酸序列的cdr-l2和包含seq?id?no:178的氨基酸序列的cdr-l3；

164、b)包含vh链和hc恒定域的第二多肽，其中il-21多肽可操作地连接至所述hc恒定域的c端，其中所述hc恒定域包含杵修饰，并且其中所述vh链包含：包含seq?id?no:220的氨基酸序列的cdr-h1、包含seq?id?no:221的氨基酸序列的cdr-h2和包含seq?id?no:222的氨基酸序列的cdr-h3；

165、c)包含vh链和hc恒定域的第三多肽，其中所述hc恒定域包含臼修饰，并且其中所述第二多肽和所述第三多肽的所述vh链是相同的；和

166、d)包含vl链和cl1链的第四多肽，其中所述第一多肽和所述第四多肽的所述vl链是相同的，并且

167、其中所述il-21多肽包含(i)提供相对于包含seq?id?no:1的人类il-21多肽降低的等电点的一个或多个氨基酸取代，其中所述一个或多个氨基酸取代是在seq?id?no:1的s80至t92内，其中至少一个氨基酸取代是在残基r85、r86、k88、h89、r90或其组合处；和(ii)提供相对于所述人类il-21多肽的结合减少的与人类il-21受体的结合的至少一个氨基酸取代。

168、在一些实施方案中，本公开提供了一种融合蛋白，所述融合蛋白包含：

169、a)包含vl链和cl1链的第一多肽，其中所述vl链包含：包含seq?id?no:176的氨基酸序列的cdr-l1、包含seq?id?no:177的氨基酸序列的cdr-l2和包含seq?id?no:178的氨基酸序列的cdr-l3；

170、b)包含vh链和hc恒定域的第二多肽，其中所述hc恒定域包含杵修饰，并且其中所述vh链包含：包含seq?id?no:220的氨基酸序列的cdr-h1、包含seq?id?no:221的氨基酸序列的cdr-h2和包含seq?id?no:222的氨基酸序列的cdr-h3；

171、c)包含vh链和hc恒定域的第三多肽，其中il-21多肽可操作地连接至所述hc恒定域的c端，其中所述hc恒定域包含臼修饰，并且其中所述第二多肽和所述第三多肽的所述vh链是相同的；和

172、d)包含vl链和cl1链的第四多肽，其中所述第一多肽和所述第四多肽的所述vl链是相同的，并且

173、其中所述il-21多肽包含(i)提供相对于包含seq?id?no:1的人类il-21多肽降低的等电点的一个或多个氨基酸取代，其中所述一个或多个氨基酸取代是在seq?id?no:1的s80至t92内，其中至少一个氨基酸取代是在残基r85、r86、k88、h89、r90或其组合处；和(ii)提供相对于所述人类il-21多肽的结合减少的与人类il-21受体的结合的至少一个氨基酸取代。

174、在一些实施方案中，本公开提供了一种融合蛋白，所述融合蛋白包含：

175、a)包含vl链和cl1链的第一多肽，其中所述vl链包含：包含seq?id?no:205的氨基酸序列的cdr-l1、包含seq?id?no:206的氨基酸序列的cdr-l2和包含seq?id?no:207的氨基酸序列的cdr-l3；

176、b)包含vh链和hc恒定域的第二多肽，其中il-21多肽可操作地连接至所述hc恒定域的c端，其中所述hc恒定域包含杵修饰，并且其中所述vh链包含：包含seq?id?no:199的氨基酸序列的cdr-h1、包含seq?id?no:203的氨基酸序列的cdr-h2和包含seq?id?no:204的氨基酸序列的cdr-h3；

177、c)包含vh链和hc恒定域的第三多肽，其中所述hc恒定域包含臼修饰，并且其中所述第二多肽和所述第三多肽的所述vh链是相同的；和

178、d)包含vl链和cl1链的第四多肽，其中所述第一多肽和所述第四多肽的所述vl链是相同的，并且

179、其中所述il-21多肽包含：选自seq?id?no:2、4-15和23-40的氨基酸序列，和提供相对于人类il-21多肽的结合减少的与人类il-21受体的结合的至少一个氨基酸取代。

180、在一些实施方案中，本公开提供了一种融合蛋白，所述融合蛋白包含：

181、a)包含vl链和cl1链的第一多肽，其中所述vl链包含：包含seq?id?no:205的氨基酸序列的cdr-l1、包含seq?id?no:206的氨基酸序列的cdr-l2和包含seq?id?no:207的氨基酸序列的cdr-l3；

182、b)包含vh链和hc恒定域的第二多肽，其中所述hc恒定域包含杵修饰，并且其中所述vh链包含：包含seq?id?no:199的氨基酸序列的cdr-h1、包含seq?id?no:203的氨基酸序列的cdr-h2和包含seq?id?no:204的氨基酸序列的cdr-h3；

183、c)包含vh链和hc恒定域的第三多肽，其中il-21多肽可操作地连接至所述hc恒定域的c端，其中所述hc恒定域包含臼修饰，并且其中所述第二多肽和所述第三多肽的所述vh链是相同的；和

184、d)包含vl链和cl1链的第四多肽，其中所述第一多肽和所述第四多肽的所述vl链是相同的，并且

185、其中所述il-21多肽包含：选自seq?id?no:2、4-15和23-40的氨基酸序列，和提供相对于人类il-21多肽的结合减少的与人类il-21受体的结合的至少一个氨基酸取代。

186、在一些实施方案中，本公开提供了一种融合蛋白，所述融合蛋白包含：

187、a)包含vl链和cl1链的第一多肽，其中所述vl链包含：包含seq?id?no:176的氨基酸序列的cdr-l1、包含seq?id?no:177的氨基酸序列的cdr-l2和包含seq?id?no:178的氨基酸序列的cdr-l3；

188、b)包含vh链和hc恒定域的第二多肽，其中il-21多肽可操作地连接至所述hc恒定域的c端，其中所述hc恒定域包含杵修饰，并且其中所述vh链包含：包含seq?id?no:220的氨基酸序列的cdr-h1、包含seq?id?no:221的氨基酸序列的cdr-h2和包含seq?id?no:222的氨基酸序列的cdr-h3；

189、c)包含vh链和hc恒定域的第三多肽，其中所述hc恒定域包含臼修饰，并且其中所述第二多肽和所述第三多肽的所述vh链是相同的；和

190、d)包含vl链和cl1链的第四多肽，其中所述第一多肽和所述第四多肽的所述vl链是相同的，并且

191、其中所述il-21多肽包含：选自seq?id?no:2、4-15和23-40的氨基酸序列，和提供相对于人类il-21多肽的结合减少的与人类il-21受体的结合的至少一个氨基酸取代。

192、在一些实施方案中，本公开提供了一种融合蛋白，所述融合蛋白包含：

193、a)包含vl链和cl1链的第一多肽，其中所述vl链包含：包含seq?id?no:176的氨基酸序列的cdr-l1、包含seq?id?no:177的氨基酸序列的cdr-l2和包含seq?id?no:178的氨基酸序列的cdr-l3；

194、b)包含vh链和hc恒定域的第二多肽，其中所述hc恒定域包含杵修饰，并且其中所述vh链包含：包含seq?id?no:220的氨基酸序列的cdr-h1、包含seq?id?no:221的氨基酸序列的cdr-h2和包含seq?id?no:222的氨基酸序列的cdr-h3；

195、c)包含vh链和hc恒定域的第三多肽，其中il-21多肽可操作地连接至所述hc恒定域的c端，其中所述hc恒定域包含臼修饰，并且其中所述第二多肽和所述第三多肽的所述vh链是相同的；和

196、d)包含vl链和cl1链的第四多肽，其中所述第一多肽和所述第四多肽的所述vl链是相同的，并且

197、其中所述il-21多肽包含：选自seq?id?no:2、4-15和23-40的氨基酸序列，和提供相对于人类il-21多肽的结合减少的与人类il-21受体的结合的至少一个氨基酸取代。

198、在一些实施方案中，本公开提供了一种融合蛋白，所述融合蛋白包含：

199、a)包含vl链和cl1链的第一多肽，其中所述vl链包含：包含seq?id?no:205的氨基酸序列的cdr-l1、包含seq?id?no:206的氨基酸序列的cdr-l2和包含seq?id?no:207的氨基酸序列的cdr-l3；

200、b)包含vh链和hc恒定域的第二多肽，其中il-21多肽可操作地连接至所述hc恒定域的c端，其中所述hc恒定域包含杵修饰，并且其中所述vh链包含：包含seq?id?no:199的氨基酸序列的cdr-h1、包含seq?id?no:203的氨基酸序列的cdr-h2和包含seq?id?no:204的氨基酸序列的cdr-h3；

201、c)包含vh链和hc恒定域的第三多肽，其中所述hc恒定域包含臼修饰，并且其中所述第二多肽和所述第三多肽的所述vh链是相同的；和

202、d)包含vl链和cl1链的第四多肽，其中所述第一多肽和所述第四多肽的所述vl链是相同的，并且

203、其中所述il-21多肽包含选自seq?id?no:16-21、41-98和374-379的氨基酸序列。

204、在一些实施方案中，本公开提供了一种融合蛋白，所述融合蛋白包含：

205、a)包含vl链和cl1链的第一多肽，其中所述vl链包含：包含seq?id?no:205的氨基酸序列的cdr-l1、包含seq?id?no:206的氨基酸序列的cdr-l2和包含seq?id?no:207的氨基酸序列的cdr-l3；

206、b)包含vh链和hc恒定域的第二多肽，其中所述hc恒定域包含杵修饰，并且其中所述vh链包含：包含seq?id?no:199的氨基酸序列的cdr-h1、包含seq?id?no:203的氨基酸序列的cdr-h2和包含seq?id?no:204的氨基酸序列的cdr-h3；

207、c)包含vh链和hc恒定域的第三多肽，其中il-21多肽可操作地连接至所述hc恒定域的c端，其中所述hc恒定域包含臼修饰，并且其中所述第二多肽和所述第三多肽的所述vh链是相同的；和

208、d)包含vl链和cl1链的第四多肽，其中所述第一多肽和所述第四多肽的所述vl链是相同的，并且

209、其中所述il-21多肽包含选自seq?id?no:16-21、41-98和374-379的氨基酸序列。

210、在一些实施方案中，本公开提供了一种融合蛋白，所述融合蛋白包含：

211、a)包含vl链和cl1链的第一多肽，其中所述vl链包含：包含seq?id?no:176的氨基酸序列的cdr-l1、包含seq?id?no:177的氨基酸序列的cdr-l2和包含seq?id?no:178的氨基酸序列的cdr-l3；

212、b)包含vh链和hc恒定域的第二多肽，其中il-21多肽可操作地连接至所述hc恒定域的c端，其中所述hc恒定域包含杵修饰，并且其中所述vh链包含：包含seq?id?no:220的氨基酸序列的cdr-h1、包含seq?id?no:221的氨基酸序列的cdr-h2和包含seq?id?no:222的氨基酸序列的cdr-h3；

213、c)包含vh链和hc恒定域的第三多肽，其中所述hc恒定域包含臼修饰，并且其中所述第二多肽和所述第三多肽的所述vh链是相同的；和

214、d)包含vl链和cl1链的第四多肽，其中所述第一多肽和所述第四多肽的所述vl链是相同的，并且

215、其中所述il-21多肽包含选自seq?id?no:16-21、41-98和374-379的氨基酸序列。

216、在一些实施方案中，本公开提供了一种融合蛋白，所述融合蛋白包含：

217、a)包含vl链和cl1链的第一多肽，其中所述vl链包含：包含seq?id?no:176的氨基酸序列的cdr-l1、包含seq?id?no:177的氨基酸序列的cdr-l2和包含seq?id?no:178的氨基酸序列的cdr-l3；

218、b)包含vh链和hc恒定域的第二多肽，其中所述hc恒定域包含杵修饰，并且其中所述vh链包含：包含seq?id?no:220的氨基酸序列的cdr-h1、包含seq?id?no:221的氨基酸序列的cdr-h2和包含seq?id?no:222的氨基酸序列的cdr-h3；

219、c)包含vh链和hc恒定域的第三多肽，其中il-21多肽可操作地连接至所述hc恒定域的c端，其中所述hc恒定域包含臼修饰，并且其中所述第二多肽和所述第三多肽的所述vh链是相同的；和

220、d)包含vl链和cl1链的第四多肽，其中所述第一多肽和所述第四多肽的所述vl链是相同的，并且

221、其中所述il-21多肽包含选自seq?id?no:16-21、41-98和374-379的氨基酸序列。

222、在一些实施方案中，本公开提供了一种融合蛋白，所述融合蛋白包含：

223、a)包含vl链和cl1链的第一多肽，其中所述vl链包含：包含seq?id?no:205的氨基酸序列的cdr-l1、包含seq?id?no:206的氨基酸序列的cdr-l2和包含seq?id?no:207的氨基酸序列的cdr-l3；

224、b)包含vh链和hc恒定域的第二多肽，其中il-21多肽可操作地连接至所述hc恒定域的c端，其中所述hc恒定域包含杵修饰，并且其中所述vh链包含：包含seq?id?no:241的氨基酸序列的cdr-h1、包含seq?id?no:243的氨基酸序列的cdr-h2和包含seq?id?no:204的氨基酸序列的cdr-h3；

225、c)包含vh链和hc恒定域的第三多肽，其中所述hc恒定域包含臼修饰，并且其中所述第二多肽和所述第三多肽的所述vh链是相同的；和

226、d)包含vl链和cl1链的第四多肽，其中所述第一多肽和所述第四多肽的所述vl链是相同的，并且

227、其中所述il-21多肽包含(i)提供相对于包含seq?id?no:1的人类il-21多肽降低的等电点的一个或多个氨基酸取代，其中所述一个或多个氨基酸取代是在seq?id?no:1的s80至t92内，其中至少一个氨基酸取代是在残基r85、r86、k88、h89、r90或其组合处；和(ii)提供相对于所述人类il-21多肽的结合减少的与人类il-21受体的结合的至少一个氨基酸取代。

228、在一些实施方案中，本公开提供了一种融合蛋白，所述融合蛋白包含：

229、a)包含vl链和cl1链的第一多肽，其中所述vl链包含：包含seq?id?no:205的氨基酸序列的cdr-l1、包含seq?id?no:206的氨基酸序列的cdr-l2和包含seq?id?no:207的氨基酸序列的cdr-l3；

230、b)包含vh链和hc恒定域的第二多肽，其中所述hc恒定域包含杵修饰，并且其中所述vh链包含：包含seq?id?no:241的氨基酸序列的cdr-h1、包含seq?id?no:243的氨基酸序列的cdr-h2和包含seq?id?no:204的氨基酸序列的cdr-h3；

231、c)包含vh链和hc恒定域的第三多肽，其中il-21多肽可操作地连接至所述hc恒定域的c端，其中所述hc恒定域包含臼修饰，并且其中所述第二多肽和所述第三多肽的所述vh链是相同的；和

232、d)包含vl链和cl1链的第四多肽，其中所述第一多肽和所述第四多肽的所述vl链是相同的，并且

233、其中所述il-21多肽包含(i)提供相对于包含seq?id?no:1的人类il-21多肽降低的等电点的一个或多个氨基酸取代，其中所述一个或多个氨基酸取代是在seq?id?no:1的s80至t92内，其中至少一个氨基酸取代是在残基r85、r86、k88、h89、r90或其组合处；和(ii)提供相对于所述人类il-21多肽的结合减少的与人类il-21受体的结合的至少一个氨基酸取代。

234、在一些实施方案中，本公开提供了一种融合蛋白，所述融合蛋白包含：

235、a)包含vl链和cl1链的第一多肽，其中所述vl链包含：包含seq?id?no:176的氨基酸序列的cdr-l1、包含seq?id?no:177的氨基酸序列的cdr-l2和包含seq?id?no:178的氨基酸序列的cdr-l3；

236、b)包含vh链和hc恒定域的第二多肽，其中il-21多肽可操作地连接至所述hc恒定域的c端，其中所述hc恒定域包含杵修饰，并且其中所述vh链包含：包含seq?id?no:250的氨基酸序列的cdr-h1、包含seq?id?no:251的氨基酸序列的cdr-h2和包含seq?id?no:288的氨基酸序列的cdr-h3；

237、c)包含vh链和hc恒定域的第三多肽，其中所述hc恒定域包含臼修饰，并且其中所述第二多肽和所述第三多肽的所述vh链是相同的；和

238、d)包含vl链和cl1链的第四多肽，其中所述第一多肽和所述第四多肽的所述vl链是相同的，并且

239、其中所述il-21多肽包含(i)提供相对于包含seq?id?no:1的人类il-21多肽降低的等电点的一个或多个氨基酸取代，其中所述一个或多个氨基酸取代是在seq?id?no:1的s80至t92内，其中至少一个氨基酸取代是在残基r85、r86、k88、h89、r90或其组合处；和(ii)提供相对于所述人类il-21多肽的结合减少的与人类il-21受体的结合的至少一个氨基酸取代。

240、在一些实施方案中，本公开提供了一种融合蛋白，所述融合蛋白包含：

241、a)包含vl链和cl1链的第一多肽，其中所述vl链包含：包含seq?id?no:176的氨基酸序列的cdr-l1、包含seq?id?no:177的氨基酸序列的cdr-l2和包含seq?id?no:178的氨基酸序列的cdr-l3；

242、b)包含vh链和hc恒定域的第二多肽，其中所述hc恒定域包含杵修饰，并且其中所述vh链包含：包含seq?id?no:250的氨基酸序列的cdr-h1、包含seq?id?no:251的氨基酸序列的cdr-h2和包含seq?id?no:288的氨基酸序列的cdr-h3；

243、c)包含vh链和hc恒定域的第三多肽，其中il-21多肽可操作地连接至所述hc恒定域的c端，其中所述hc恒定域包含臼修饰，并且其中所述第二多肽和所述第三多肽的所述vh链是相同的；和

244、d)包含vl链和cl1链的第四多肽，其中所述第一多肽和所述第四多肽的所述vl链是相同的，并且

245、其中所述il-21多肽包含(i)提供相对于包含seq?id?no:1的人类il-21多肽降低的等电点的一个或多个氨基酸取代，其中所述一个或多个氨基酸取代是在seq?id?no:1的s80至t92内，其中至少一个氨基酸取代是在残基r85、r86、k88、h89、r90或其组合处；和(ii)提供相对于所述人类il-21多肽的结合减少的与人类il-21受体的结合的至少一个氨基酸取代。

246、在一些实施方案中，本公开提供了一种融合蛋白，所述融合蛋白包含：

247、a)包含vl链和cl1链的第一多肽，其中所述vl链包含：包含seq?id?no:205的氨基酸序列的cdr-l1、包含seq?id?no:206的氨基酸序列的cdr-l2和包含seq?id?no:207的氨基酸序列的cdr-l3；

248、b)包含vh链和hc恒定域的第二多肽，其中il-21多肽可操作地连接至所述hc恒定域的c端，其中所述hc恒定域包含杵修饰，并且其中所述vh链包含：包含seq?id?no:241的氨基酸序列的cdr-h1、包含seq?id?no:243的氨基酸序列的cdr-h2和包含seq?id?no:204的氨基酸序列的cdr-h3；

249、c)包含vh链和hc恒定域的第三多肽，其中所述hc恒定域包含臼修饰，并且其中所述第二多肽和所述第三多肽的所述vh链是相同的；和

250、d)包含vl链和cl1链的第四多肽，其中所述第一多肽和所述第四多肽的所述vl链是相同的，并且

251、其中所述il-21多肽包含：选自seq?id?no:2、4-15和23-40的氨基酸序列，和提供相对于人类il-21多肽的结合减少的与人类il-21受体的结合的至少一个氨基酸取代。

252、在一些实施方案中，本公开提供了一种融合蛋白，所述融合蛋白包含：

253、a)包含vl链和cl1链的第一多肽，其中所述vl链包含：包含seq?id?no:205的氨基酸序列的cdr-l1、包含seq?id?no:206的氨基酸序列的cdr-l2和包含seq?id?no:207的氨基酸序列的cdr-l3；

254、b)包含vh链和hc恒定域的第二多肽，其中所述hc恒定域包含杵修饰，并且其中所述vh链包含：包含seq?id?no:241的氨基酸序列的cdr-h1、包含seq?id?no:243的氨基酸序列的cdr-h2和包含seq?id?no:204的氨基酸序列的cdr-h3；

255、c)包含vh链和hc恒定域的第三多肽，其中il-21多肽可操作地连接至所述hc恒定域的c端，其中所述hc恒定域包含臼修饰，并且其中所述第二多肽和所述第三多肽的所述vh链是相同的；和

256、d)包含vl链和cl1链的第四多肽，其中所述第一多肽和所述第四多肽的所述vl链是相同的，并且

257、其中所述il-21多肽包含：选自seq?id?no:2、4-15和23-40的氨基酸序列，和提供相对于人类il-21多肽的结合减少的与人类il-21受体的结合的至少一个氨基酸取代。

258、在一些实施方案中，本公开提供了一种融合蛋白，所述融合蛋白包含：

259、a)包含vl链和cl1链的第一多肽，其中所述vl链包含：包含seq?id?no:176的氨基酸序列的cdr-l1、包含seq?id?no:177的氨基酸序列的cdr-l2和包含seq?id?no:178的氨基酸序列的cdr-l3；

260、b)包含vh链和hc恒定域的第二多肽，其中il-21多肽可操作地连接至所述hc恒定域的c端，其中所述hc恒定域包含杵修饰，并且其中所述vh链包含：包含seq?id?no:250的氨基酸序列的cdr-h1、包含seq?id?no:251的氨基酸序列的cdr-h2和包含seq?id?no:288的氨基酸序列的cdr-h3；

261、c)包含vh链和hc恒定域的第三多肽，其中所述hc恒定域包含臼修饰，并且其中所述第二多肽和所述第三多肽的所述vh链是相同的；和

262、d)包含vl链和cl1链的第四多肽，其中所述第一多肽和所述第四多肽的所述vl链是相同的，并且

263、其中所述il-21多肽包含：选自seq?id?no:2、4-15和23-40的氨基酸序列，和提供相对于人类il-21多肽的结合减少的与人类il-21受体的结合的至少一个氨基酸取代。

264、在一些实施方案中，本公开提供了一种融合蛋白，所述融合蛋白包含：

265、a)包含vl链和cl1链的第一多肽，其中所述vl链包含：包含seq?id?no:176的氨基酸序列的cdr-l1、包含seq?id?no:177的氨基酸序列的cdr-l2和包含seq?id?no:178的氨基酸序列的cdr-l3；

266、b)包含vh链和hc恒定域的第二多肽，其中所述hc恒定域包含杵修饰，并且其中所述vh链包含：包含seq?id?no:250的氨基酸序列的cdr-h1、包含seq?id?no:251的氨基酸序列的cdr-h2和包含seq?id?no:288的氨基酸序列的cdr-h3；

267、c)包含vh链和hc恒定域的第三多肽，其中il-21多肽可操作地连接至所述hc恒定域的c端，其中所述hc恒定域包含臼修饰，并且其中所述第二多肽和所述第三多肽的所述vh链是相同的；和

268、d)包含vl链和cl1链的第四多肽，其中所述第一多肽和所述第四多肽的所述vl链是相同的，并且

269、其中所述il-21多肽包含：选自seq?id?no:2、4-15和23-40的氨基酸序列，和提供相对于人类il-21多肽的结合减少的与人类il-21受体的结合的至少一个氨基酸取代。

270、在一些实施方案中，本公开提供了一种融合蛋白，所述融合蛋白包含：

271、a)包含vl链和cl1链的第一多肽，其中所述vl链包含：包含seq?id?no:205的氨基酸序列的cdr-l1、包含seq?id?no:206的氨基酸序列的cdr-l2和包含seq?id?no:207的氨基酸序列的cdr-l3；

272、b)包含vh链和hc恒定域的第二多肽，其中il-21多肽可操作地连接至所述hc恒定域的c端，其中所述hc恒定域包含杵修饰，并且其中所述vh链包含：包含seq?id?no:241的氨基酸序列的cdr-h1、包含seq?id?no:243的氨基酸序列的cdr-h2和包含seq?id?no:204的氨基酸序列的cdr-h3；

273、c)包含vh链和hc恒定域的第三多肽，其中所述hc恒定域包含臼修饰，并且其中所述第二多肽和所述第三多肽的所述vh链是相同的；和

274、d)包含vl链和cl1链的第四多肽，其中所述第一多肽和所述第四多肽的所述vl链是相同的，并且

275、其中所述il-21多肽包含选自seq?id?no:16-21、41-98和374-379的氨基酸序列。

276、在一些实施方案中，本公开提供了一种融合蛋白，所述融合蛋白包含：

277、a)包含vl链和cl1链的第一多肽，其中所述vl链包含：包含seq?id?no:205的氨基酸序列的cdr-l1、包含seq?id?no:206的氨基酸序列的cdr-l2和包含seq?id?no:207的氨基酸序列的cdr-l3；

278、b)包含vh链和hc恒定域的第二多肽，其中所述hc恒定域包含杵修饰，并且其中所述vh链包含：包含seq?id?no:241的氨基酸序列的cdr-h1、包含seq?id?no:243的氨基酸序列的cdr-h2和包含seq?id?no:204的氨基酸序列的cdr-h3；

279、c)包含vh链和hc恒定域的第三多肽，其中il-21多肽可操作地连接至所述hc恒定域的c端，其中所述hc恒定域包含臼修饰，并且其中所述第二多肽和所述第三多肽的所述vh链是相同的；和

280、d)包含vl链和cl1链的第四多肽，其中所述第一多肽和所述第四多肽的所述vl链是相同的，并且

281、其中所述vh链和所述vl链包含特异性结合至cd8αβ或cd8β的cdr，

282、其中所述il-21多肽包含选自seq?id?no:16-21、41-98和374-379的氨基酸序列。

283、在一些实施方案中，本公开提供了一种融合蛋白，所述融合蛋白包含：

284、a)包含vl链和cl1链的第一多肽，其中所述vl链包含：包含seq?id?no:176的氨基酸序列的cdr-l1、包含seq?id?no:177的氨基酸序列的cdr-l2和包含seq?id?no:178的氨基酸序列的cdr-l3；

285、b)包含vh链和hc恒定域的第二多肽，其中il-21多肽可操作地连接至所述hc恒定域的c端，其中所述hc恒定域包含杵修饰，并且其中所述vh链包含：包含seq?id?no:250的氨基酸序列的cdr-h1、包含seq?id?no:251的氨基酸序列的cdr-h2和包含seq?id?no:288的氨基酸序列的cdr-h3；

286、c)包含vh链和hc恒定域的第三多肽，其中所述hc恒定域包含臼修饰，并且其中所述第二多肽和所述第三多肽的所述vh链是相同的；和

287、d)包含vl链和cl1链的第四多肽，其中所述第一多肽和所述第四多肽的所述vl链是相同的，并且

288、其中所述il-21多肽包含选自seq?id?no:16-21、41-98和374-379的氨基酸序列。

289、在一些实施方案中，本公开提供了一种融合蛋白，所述融合蛋白包含：

290、a)包含vl链和cl1链的第一多肽，其中所述vl链包含：包含seq?id?no:176的氨基酸序列的cdr-l1、包含seq?id?no:177的氨基酸序列的cdr-l2和包含seq?id?no:178的氨基酸序列的cdr-l3；

291、b)包含vh链和hc恒定域的第二多肽，其中所述hc恒定域包含杵修饰，并且其中所述vh链包含：包含seq?id?no:250的氨基酸序列的cdr-h1、包含seq?id?no:251的氨基酸序列的cdr-h2和包含seq?id?no:288的氨基酸序列的cdr-h3；

292、c)包含vh链和hc恒定域的第三多肽，其中il-21多肽可操作地连接至所述hc恒定域的c端，其中所述hc恒定域包含臼修饰，并且其中所述第二多肽和所述第三多肽的所述vh链是相同的；和

293、d)包含vl链和cl1链的第四多肽，其中所述第一多肽和所述第四多肽的所述vl链是相同的，并且

294、其中所述il-21多肽包含选自seq?id?no:16-21、41-98和374-379的氨基酸序列。

295、在一些实施方案中，所述融合蛋白包含四个多肽链，其中：

296、第一多肽链包含seq?id?no:262的氨基酸序列，第二多肽链包含seq?id?no:263的氨基酸序列，第三多肽链包含seq?id?no:264的氨基酸序列，并且第四多肽链包含seq?idno:262的氨基酸序列；

297、第一多肽链包含seq?id?no:266的氨基酸序列，第二多肽链包含seq?id?no:267的氨基酸序列，第三多肽链包含seq?id?no:268的氨基酸序列，并且第四多肽链包含seq?idno:266的氨基酸序列；

298、第一多肽链包含seq?id?no:270的氨基酸序列，第二多肽链包含seq?id?no:271的氨基酸序列，第三多肽链包含seq?id?no:272的氨基酸序列，并且第四多肽链包含seq?idno:270的氨基酸序列；

299、第一多肽链包含seq?id?no:274的氨基酸序列，第二多肽链包含seq?id?no:275的氨基酸序列，第三多肽链包含seq?id?no:276的氨基酸序列，并且第四多肽链包含seq?idno:274的氨基酸序列；或

300、第一多肽链包含seq?id?no:278的氨基酸序列，第二多肽链包含seq?id?no:279的氨基酸序列，第三多肽链包含seq?id?no:280的氨基酸序列，并且第四多肽链包含seq?idno:278的氨基酸序列。

301、在一些实施方案中，所述融合蛋白包含四个多肽链，其中：

302、第一多肽链包含seq?id?no:262的氨基酸序列，第二多肽链包含seq?id?no:263的氨基酸序列，第三多肽链包含seq?id?no:265的氨基酸序列，并且第四多肽链包含seq?idno:262的氨基酸序列；

303、第一多肽链包含seq?id?no:266的氨基酸序列，第二多肽链包含seq?id?no:267的氨基酸序列，第三多肽链包含seq?id?no:269的氨基酸序列，并且第四多肽链包含seq?idno:266的氨基酸序列；

304、第一多肽链包含seq?id?no:270的氨基酸序列，第二多肽链包含seq?id?no:271的氨基酸序列，第三多肽链包含seq?id?no:273的氨基酸序列，并且第四多肽链包含seq?idno:270的氨基酸序列；

305、第一多肽链包含seq?id?no:274的氨基酸序列，第二多肽链包含seq?id?no:275的氨基酸序列，第三多肽链包含seq?id?no:277的氨基酸序列，并且第四多肽链包含seq?idno:274的氨基酸序列；或

306、第一多肽链包含seq?id?no:278的氨基酸序列，第二多肽链包含seq?id?no:279的氨基酸序列，第三多肽链包含seq?id?no:281的氨基酸序列，并且第四多肽链包含seq?idno:278的氨基酸序列。

307、在一些实施方案中，所述融合蛋白包含四个多肽链，其中：

308、(a)第一多肽链包含seq?id?no:297的氨基酸序列，第二多肽链包含seq?id?no:298的氨基酸序列，第三多肽链包含seq?id?no:299的氨基酸序列，并且第四多肽链包含seqid?no:297的氨基酸序列；

309、(b)第一多肽链包含seq?id?no:301的氨基酸序列，第二多肽链包含seq?id?no:302的氨基酸序列，第三多肽链包含seq?id?no:303的氨基酸序列，并且第四多肽链包含seqid?no:301的氨基酸序列；

310、(c)第一多肽链包含seq?id?no:305的氨基酸序列，第二多肽链包含seq?id?no:306的氨基酸序列，第三多肽链包含seq?id?no:307的氨基酸序列，并且第四多肽链包含seqid?no:305的氨基酸序列；或

311、(d)第一多肽链包含seq?id?no:309的氨基酸序列，第二多肽链包含seq?id?no:310的氨基酸序列，第三多肽链包含seq?id?no:311的氨基酸序列，并且第四多肽链包含seqid?no:309的氨基酸序列。

312、在一些实施方案中，所述融合蛋白包含四个多肽链，其中：

313、(a)第一多肽链包含seq?id?no:297的氨基酸序列，第二多肽链包含seq?id?no:298的氨基酸序列，第三多肽链包含seq?id?no:300的氨基酸序列，并且第四多肽链包含seqid?no:297的氨基酸序列；

314、(b)第一多肽链包含seq?id?no:301的氨基酸序列，第二多肽链包含seq?id?no:302的氨基酸序列，第三多肽链包含seq?id?no:304的氨基酸序列，并且第四多肽链包含seqid?no:301的氨基酸序列；

315、(c)第一多肽链包含seq?id?no:305的氨基酸序列，第二多肽链包含seq?id?no:306的氨基酸序列，第三多肽链包含seq?id?no:308的氨基酸序列，并且第四多肽链包含seqid?no:305的氨基酸序列；或

316、(d)第一多肽链包含seq?id?no:309的氨基酸序列，第二多肽链包含seq?id?no:310的氨基酸序列，第三多肽链包含seq?id?no:312的氨基酸序列，并且第四多肽链包含seqid?no:309的氨基酸序列。

317、通过引用并入

318、本说明书中所提及的所有出版物、专利和专利申请都通过引用并入本文，其引用程度如同特定地且个别地指示每个个别出版物、专利或专利申请通过引用并入一般。